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zpm119918

新虫 (初入文坛)

[求助] 峰分不开 已有2人参与

流动相A:100mM KH2PO4   B:100mM KH2PO4:乙腈=50：50
梯度
T   0  10    25  50
B   5   5     50  80
柱子：安捷伦XDB长柱0

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峰分不开


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1楼 2016-03-29 16:37:07
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tata100166

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.目前所用的这根Agilent的色谱柱的柱效如何，如不好建议换根新的柱效好的Agilent。
2.可否把时间10~25再延长点，B相的比例变为50%降低点看对分离有无改善？
3.若通过调节比例和时间均不行，考虑调节缓冲盐的pH值，感觉现在配的好像没有调pH值吧。
4.最后也可以建议换跟保留强的色谱柱，之前用过的迪马品牌的25cm的色谱柱保留还算较强的，你可以考虑一下。
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2楼2016-03-29 17:15:05
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zpm119918

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tata100166 at 2016-03-29 17:15:05
1.目前所用的这根Agilent的色谱柱的柱效如何，如不好建议换根新的柱效好的Agilent。
2.可否把时间10~25再延长点，B相的比例变为50%降低点看对分离有无改善？
3.若通过调节比例和时间均不行，考虑调节缓冲盐的pH值 ...

谢谢

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3楼2016-03-30 08:55:27
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李立兵

新虫 (小有名气)
如果梯度或PH  都分不开，建议换流动相或不同性能的色谱柱

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4楼2016-03-31 16:54:33
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zxb853279529

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定要用那么高浓度的缓冲液，一般色谱柱使用的缓冲液中缓冲盐在25-50mM，你可以先用乙腈-水体系走个梯度做下，不行再加缓冲盐，
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天际浮云。。。。
5楼2016-04-01 16:02:58
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