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七号米

金虫 (小有名气)

[求助] ABTS 溶液配置 已有2人参与

请教做过ABTS 抗氧化实验的同仁,我配的ABTS避光过夜后,吸光值只有0.4怎么回事?更不用说稀释了

我参考的文献的做法是:一个做法:5 mL 7 mmol/L ABTS+和88 μL 140 mmol/L过硫酸钾混合
另一种做法:50mL  2mM ABTS  和 200 μL  70mM 过硫酸钾 混合

两种方法都是避光过夜,吸光值都是只有0.4左右。求高手指导一下!
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

我的方法,放好长时间也没有事,千万别配多,用不完的。母液OD值太高。
ABTS 溶液配置



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3楼2016-03-29 20:44:15
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 七号米 at 2016-03-30 10:26:05
谢谢你,我再试一下你的方法。...

你测的时候,一次不要太多,50个样品以下,从OD  0.7下降的不会很多,每组测的时候都要调到0.7再测

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8楼2016-03-30 10:35:39
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
七号米(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助,谢谢 2016-03-29 22:50:39
ABTS溶液(7 mmol/L), 4.95 mmol/L 的过硫酸钾溶液,混合(v/v 1:1),室温暗处放置12 h后使用
2楼2016-03-29 17:38:48
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
七号米(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-29 22:50:54
七号米: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-03-31 16:32:37
我的方法,放好长时间也没有事,千万别配多,用不完的。母液OD值太高
ABTS 溶液配置-1



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4楼2016-03-29 20:45:13
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七号米

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mlxmiao at 2016-03-29 20:44:15
我的方法,放好长时间也没有事,千万别配多,用不完的。母液OD值太高。

你做的 ABTS 和 过硫酸钾 都是水溶液吗?测 OD的时候你的参比是啥?
5楼2016-03-30 10:05:33
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 七号米 at 2016-03-30 10:05:33
你做的 ABTS 和 过硫酸钾 都是水溶液吗?测 OD的时候你的参比是啥?...

水。测OD值时因为用乙醇稀释的,所以用它来做对照。附件是参考文献
ABTS 溶液配置-2



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6楼2016-03-30 10:14:23
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七号米

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mlxmiao at 2016-03-30 10:14:23
水。测OD值时因为用乙醇稀释的,所以用它来做对照。附件是参考文献

...

谢谢你,我再试一下你的方法。
7楼2016-03-30 10:26:05
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七号米

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mlxmiao at 2016-03-30 10:35:39
你测的时候,一次不要太多,50个样品以下,从OD  0.7下降的不会很多,每组测的时候都要调到0.7再测
...

试了一下你的方法,还是0.4,会不会是我的试剂有问题啊?
9楼2016-03-31 16:31:32
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

对一下你的试剂,有没有弄错,分子式,分子量都要对。分光光度计别错了,比色皿正反不要错了。如果还不对,有可能试剂过期了

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10楼2016-03-31 17:31:35
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