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zhangpy819

铁虫 (小有名气)

[交流] 请教柱层析

请问硅胶柱和凝胶柱层析有什么区别?
谢谢!
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药物达人
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l379989165

金虫 (正式写手)

水晶


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
硅胶柱层析原理:硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
凝胶层析原理:凝胶层析又称凝凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子无法进入凝胶颗粒中的静止相中,只能存在于凝胶颗粒之间的流动相中,因而以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因此就要花费较长的时间流经柱床,从而使不同大小的分子得以分离。
来是偶然,去是必然,尽其当然,顺其自然。得之淡然,失之泰然,争其必然,自然而然。
3楼2008-10-21 16:11:27
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ccq83ban

木虫 (正式写手)

硅胶柱层析是根据化合物极性不同进行分离,凝胶柱层析是根据化合物分子大小进行分离
2楼2008-10-21 13:49:32
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赖氨酸

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
凝胶柱层析的分离原理是:分子筛
      大分子先出来,小分子后出来。是反筛效应。
      凝胶通常是等度洗脱,流动相是甲醇和水
硅胶柱层析的分离原理是:极性吸附
      极性小的先出来,极性大的后出来。
      硅胶通常是梯度洗脱,洗脱顺序是极性由小到大。洗脱前先要做TLC,取Rf值为0.2时的展开剂为初始洗脱极性。
4楼2008-10-21 22:20:12
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yangsitao

铁虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复!
硅胶柱是利用吸附原理。利用硅胶对各个分离组分的吸附差异来分离。
凝胶柱是利用分子筛原理:小分子进入凝胶间隙,大分子先出柱,小分子后出柱。常用的是葡聚糖凝胶。Sephadex LH-20用于单体分离挺好的我用过。可是价钱也挺贵的。一小点就上千快钱。
卖身,不卖肉。
6楼2008-10-24 13:33:31
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