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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 80kDa的蛋白质诱导12000转离心后全在沉淀里，是诱导不好，还是离心下来了
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jingdream09

新虫 (初入文坛)

[交流] 80kDa的蛋白质诱导12000转离心后全在沉淀里，是诱导不好，还是离心下来了 已有5人参与

做诱导表达一个80kDa的蛋白质，之前同样方法做过两次，上清里还有50%的蛋白，又重复做了之后，蛋白全在沉淀里了。这次跟之前唯一不同就是离心机不一样，后来的离心机要好，但都是设置了12000转30min，可溶性蛋白会被离心下来吗、？还是真的是诱导的不好。？
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1楼 2016-03-29 09:21:28
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a86052

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不太可能是离心下来的，蛋白状态问题感觉是
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2楼2016-03-29 11:20:29
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jingdream09

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2016-03-29 11:20:29
不太可能是离心下来的，蛋白状态问题感觉是

谢谢回复，但是条件什么的都跟之前诱导的一样，之前上清有，这次就没了，你遇到这种情况没
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3楼2016-03-29 12:16:10
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a86052

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by jingdream09 at 2016-03-29 12:16:10
谢谢回复，但是条件什么的都跟之前诱导的一样，之前上清有，这次就没了，你遇到这种情况没...

沉淀多的蛋白我觉得容易出现这种，特别是可溶部分很少的时候，重复性比较差的
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4楼2016-03-29 16:15:46
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littlebiohit

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该诱导条件有问题 你在浊度是多少的时候加的诱导剂 你加诱导剂之后 培养温度是多少？
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5楼2016-03-30 11:05:51
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cynthia_lg

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只要蛋白是可溶性的话一般不会因为离心问题出现在沉淀里的
是不是诱导的时候诱导时间过长了？诱导时间过长的话应该容易形成包涵体的
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6楼2016-03-30 16:12:47
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朱庆平

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是包涵体哦？你这个蛋白挺大的。

发自小木虫Android客户端
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7楼2016-03-31 18:19:24
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elric

新虫 (著名写手)
★
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可能蛋白变性，或是诱导产生的包涵体不容
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8楼2016-04-01 02:44:06
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