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Ekoay

金虫 (初入文坛)

[求助] 有做细胞代谢组学的吗?可以帮我看看这到底是怎么回事吗? 已有1人参与

我处理细胞的步骤如下:吸去旧培养基,冰冷PBS清洗细胞,加入1ml 80%甲醇,-80℃放置10min。以刮刀收集细胞至10ml ep管中,加入500μl 80%甲醇收集残余细胞。冰浴探超破碎细胞。加入500μl氯仿,涡旋3min。12000rpm,4℃,离心15min。之后样品分层。按说氯仿层应该在下,水层在上。然而,结果反而是上层少下层多。所以,我迷茫了,难道是水层减少,氯仿层变多了吗?

有做细胞代谢组学的吗?可以帮我看看这到底是怎么回事吗?
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菜鸟一个,多多指教哈
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doris0106

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做过,是甲醇和水相在上层,氯仿在下面。但我是直接加了甲醇:氯仿:水=2.5:1;1的这种比例。嗯。我最近也在做这个,可以交流下~
2楼2016-03-30 20:58:05
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