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让她降落

铜虫 (正式写手)

[求助] 求教增菌培养遇到的一些问题 已有2人参与

大家好,我年前做了一个小实验需要用到增菌培养,大致方法是向水中加入5%的LB液体培养基恒温震荡培养半个月,在第10天的时候经16SrDNA的PCR处理后发现细菌的数量有比较明显的下降,想请教一下是什么原因(我问了下同学,他告诉我一般来说10天内细菌数量应该不会下降很多)。个人觉得疑点有:
    1. 培养基添加比例过高导致初期细菌量过高,后续营养不足;
    2. 锥形瓶中菌液过多,500ml的锥形瓶中有250ml菌液;
    3. 需氧操作中应该向锥形瓶口塞棉塞,而我用的是无菌透气滤膜;
    4. 培养初期菌液有一点臭气,不知道是否和细菌数量减少有关系。
    由于是初次接触细菌培养方面的实验,很多东西都不是很懂,所以将这些疑点列出来请教一下大家,谢谢大家。
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lov_new

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
让她降落: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2016-03-30 08:01:19
有一点很明显,培养基装量不适合,如果是厌氧菌,装量少了;如果是好氧菌,装量多了。
2楼2016-03-26 09:42:34
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让她降落

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lov_new at 2016-03-26 09:42:34
有一点很明显,培养基装量不适合,如果是厌氧菌,装量少了;如果是好氧菌,装量多了。

谢谢您的回复,那么一般好氧增菌培养的量是多少呢?

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3楼2016-03-27 09:13:55
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hc123

金虫 (初入文坛)

不需要半个月的,增菌只需要48小时,然后你可以取一点涂平板看看有没有你要的菌

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-03-27 09:37:54
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让她降落

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc123 at 2016-03-27 09:37:54
不需要半个月的,增菌只需要48小时,然后你可以取一点涂平板看看有没有你要的菌

额,我的实验要求半个月,另外培养是针对所有细菌好氧培养,而不需要区分某一类细菌。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-03-27 15:50:34
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lordsidious

铁杆木虫 (知名作家)

Dark Lord of the Sith

培养基吃光了你说细菌死不死

发自小木虫Android客户端
May the Force be with you.
6楼2016-03-29 09:49:00
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也许太固执

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 让她降落 at 2016-03-27 09:13:55
谢谢您的回复,那么一般好氧增菌培养的量是多少呢?
...

500ml的锥形瓶装100ml
7楼2016-03-29 10:29:33
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wonder0909

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
让她降落: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2016-03-30 08:01:04
先开始装100ml,然后每天加5~10ml培养基补充营养。最开始多试几次。每个实验开始总有段摸索时间
8楼2016-03-29 11:11:37
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