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nuomici0402

新虫 (初入文坛)

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[交流] 液体培养基常见问题已有2人参与

1. 液体培养基的保存是冷藏好还是冷冻好？
要冷藏
因为液体培养基经冷冻后再经溶化时其溶液的pH值会发生改变溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中。通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时细胞生长不良而死亡。所以各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20 ℃冰冻保存用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ℃冰箱储存两周以上时应重新加入原来量的谷氨酰胺。我们公司（杭州睿凯干细胞生物科技有限公司http://www.stemcells-cn.com/）一般配制分装高浓度100倍的谷氨酰胺溶液1ml/支。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色-24℃保存。
3.培养用液pH对细胞生长的影响。
由于大多数细胞适宜pH为7.2~7.4偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说细胞耐酸性比耐碱性强一些偏酸环境中更利于细胞生长。因此我们公司在配制培养用液时把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时溶液的pH还会向上浮动0.2左右。