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yihan343

[交流] 请教如何用超声波或别的方法裂解细菌细胞壁?急!!!

请问怎么用超声波裂解细菌细胞壁啊??我很着急,细菌是枯草杆菌

我想裂解完细胞壁之后提取里面的一种脂肪酸合成酶,但是现在碰到问题了

请达人帮我解答,我没有金币,只能说“万分感谢”了

P.S.:还有别的方法可以裂解枯草芽孢杆菌的细胞壁吗?
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fangjh0302

铜虫 (初入文坛)

可以试试反复冻融
2楼2008-10-20 23:07:37
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)

溶菌酶。
3楼2008-10-20 23:11:50
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yihan343

溶菌酶的缓冲液是什么呢?
4楼2008-10-20 23:49:57
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lazylord

金虫 (小有名气)

加非变性裂解液..然后用超声破碎仪破碎
觅一方静土,养一方人!上下求索可知方隅?孜孜自攻岂在方寸之间?
5楼2008-10-21 22:43:51
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

french ??
帮助虫友,提升自己
6楼2008-10-24 21:16:00
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shawcat

木虫 (正式写手)

渗透压有时候也有效,加25%蔗糖放置30min,再加0.02m缓冲液4℃过夜。我用的也是芽孢杆菌,效果不错!
7楼2008-10-24 22:57:47
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)

引用一段网文:

鸡蛋清溶菌酶
      鸡蛋清中约含有0.3%的溶菌酶,该溶菌酶能分解溶壁小球菌,巨大芽孢杆菌,黄色八迭球菌等革兰氏阳性菌,但对革兰氏阴性菌无分解作用。当有乙二胺四醋酸存在时,某些革兰氏阴性菌也可以被该溶菌酶分解。溶菌酶的溶菌机理异常复杂,在其被发现的三十年以后,人们才逐步认识到它的作用部位。迄今,鸡蛋清溶菌酶,作为动植物中广泛存在的溶解酶的典型代表,仍然是溶菌酶群中重点的研究者,也是目前了解最清楚的溶菌酶之一。鸡蛋清溶菌酶,分子为 14,0000等电点为11.1,最适溶菌温度为50℃,最适PH值为7。鸡蛋清溶菌酶是一种化学性质非常稳定的蛋白质,当PH值在1.2-11.3范围内剧烈变化时,其结构仍稳定不变,遇热时该酶也很稳定,在PH 4~7的范围内,100℃处理1min,仍保持原酶活性,但在碱性环境中,该酶对热稳定性较差。鸡蛋清溶菌酶的一级结构由129个氨基酸组成,其稳定性主要与多级结构中的4个二硫键、氢键及硫水键有关。
http://www.hdbio.cn/rjm.htm

我们实验室一般直接将溶菌酶粉末加到菌悬液中,终浓度通常为5-20mg/ml。
另外,可考虑石英砂研磨、液氮研磨,但我没有试过枯草菌。
每天在本页面右上角(全屏时)点击“今日红包”即可获取金币,我就是这样做的。


[ Last edited by qgaoamtf on 2008-10-28 at 14:33 ]
8楼2008-10-28 14:31:38
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yihan343

谢谢各位的指点
9楼2008-10-31 09:20:50
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