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澜屿泠舟

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞染菌有什么好办法吗 已有1人参与

前段时间养绒毛膜肿瘤细胞,发现总有地方长不满,开始以为铺的不均匀,后来在高倍镜下仔细看了一下,发现空缺的地方是有零星的菌(自转的小黑点)的,不知道是哪种菌,观察发现培养基也没有变混,但是细胞颗粒很多,而且细胞应该是挨着长满的,现在总有地方空出来没法做以后的实验。有什么解决办法吗
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

有没有图  有图最好看下
能想的就是双抗(但不混浊,细菌的可能性不大,作用应该不明显)
多PBS清洗以及加新鲜培养基  消化传代时换新皿,加大细胞悬液量
2楼2016-03-23 14:00:19
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MarchZR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
澜屿泠舟: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-23 22:12:40
小黑点的话,其实还好办,应该是黑胶虫,不是什么霉菌支原体等就行,黑胶虫和细胞生长有竞争趋势,如果小黑点不是很多,你现在想办法让细胞长好一点,少量的黑胶虫不会产生什么实质性的影响,但你要控制好哦
细胞培养FAQ:
http://www.detaibio.com/topics/cell-culture-faq.html
好运~
3楼2016-03-23 14:55:57
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澜屿泠舟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by MarchZR at 2016-03-23 14:55:57
小黑点的话,其实还好办,应该是黑胶虫,不是什么霉菌支原体等就行,黑胶虫和细胞生长有竞争趋势,如果小黑点不是很多,你现在想办法让细胞长好一点,少量的黑胶虫不会产生什么实质性的影响,但你要控制好哦
细胞培 ...

谢谢啦,我观察一下,看来觉原来应该是传代密度有点低了,导致细胞收了影响
4楼2016-03-23 22:14:18
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澜屿泠舟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 四夕流年 at 2016-03-23 14:00:19
有没有图  有图最好看下
能想的就是双抗(但不混浊,细菌的可能性不大,作用应该不明显)
多PBS清洗以及加新鲜培养基  消化传代时换新皿,加大细胞悬液量

忘记拍个照了,试过双抗,确实还是有。现在看来可能只能多清洗了
5楼2016-03-23 22:17:36
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songkaide

木虫 (正式写手)

6楼2016-03-24 15:44:28
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澜屿泠舟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by songkaide at 2016-03-24 15:44:28
双抗浓度多少

5%体积比的
7楼2016-03-25 08:26:04
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

引用回帖:
2楼: Originally posted by 四夕流年 at 2016-03-23 14:00:19
有没有图  有图最好看下
能想的就是双抗(但不混浊,细菌的可能性不大,作用应该不明显)
多PBS清洗以及加新鲜培养基  消化传代时换新皿,加大细胞悬液量

菜鸟一个,问问题可能较鲁莽,请见谅
传代用加抗生素吗?为什么加?不加有什么严重后果不?
.....
8楼2016-03-26 09:50:44
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by cifer1230 at 2016-03-26 09:50:44
菜鸟一个,问问题可能较鲁莽,请见谅
传代用加抗生素吗?为什么加?不加有什么严重后果不?...

看你本身细胞的状态  我培养的细胞都不加双抗 从没污染 细胞状态及其好(条件好点,有污染苗条的直接扔  公司啊  嘿嘿)
上一家公司工作时细胞必须加双抗 不然细胞状态就不行或则时不时污染   
对实验来讲最好不加双抗  避免对实验影响 加只是为了细胞能很好的服务实验
例如 LIP2000转染时最好用无双抗的培养基培养   不是说加了就怎么  而且相对而言   不加更好
总结  能不加就不加   当污染而细胞又珍贵或急用,而且加了双抗有用时   你还坚持不加吗?  嘿嘿
祝好
9楼2016-03-26 13:17:49
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