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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗原偶联 已有1人参与

抗原偶联时在摇床上进行，转速280，后用0.5 ml 超滤离心管离心后14000 g，10min，回收的浓缩液浓度几乎为 0，以前用4 ml 超滤离心管没出现过这种情况。问：1.搅拌速率太高会不会影响偶联效果？ 2. 离心转速太高是否会将偶联的抗原分开，或者破坏蛋白？ 3. 检测得到的浓度几乎为0，蛋白都去哪里了？ 4. 不同规格的超滤离心管使用得到的效果差异会大吗，是不是离心管的问题？
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1楼 2016-03-21 15:36:18
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq：858200882

【答案】应助回帖

★ ★ ★
静静的顿河1: 金币+3 2016-03-28 13:33:06
离心的话你注意下孔径还有就是你的离心管是不是已经漏了，如果偶联上了不会太损伤。
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本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882
2楼2016-03-27 14:36:45
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by limichuan at 2016-03-27 14:36:45
离心的话你注意下孔径还有就是你的离心管是不是已经漏了，如果偶联上了不会太损伤。

谢谢，那如果偶联时摇晃太快会影响其偶联吗，这次偶联是在摇床上进行的，以前都得水浴锅。
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3楼2016-03-28 13:33:08
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq：858200882

【答案】应助回帖

★ ★ ★
静静的顿河1: 金币+3 2016-03-30 19:49:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by 静静的顿河1 at 2016-03-28 13:33:08
谢谢，那如果偶联时摇晃太快会影响其偶联吗，这次偶联是在摇床上进行的，以前都得水浴锅。...

问题不大，你所谓的太快也肯定不是那种剧烈的。是可以接受的。
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本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882
4楼2016-03-29 02:48:28
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1005634961

金虫 (小有名气)
转速有点高，但不至于没反应

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5楼2016-03-29 07:38:40
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)
其实最想知道的是为什么超滤离心后没检测到浓度，蛋白都去哪里了呢？ ？？

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6楼2016-03-29 22:37:40
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hnr374q

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 静静的顿河1 at 2016-03-29 22:37:40
其实最想知道的是为什么超滤离心后没检测到浓度，蛋白都去哪里了呢？ ？？

遇到相同的问题，50kd，1000g 离心15分钟，出来就到死体积了。检测浓度几乎为零。楼主找到解决办法了吗

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7楼2018-01-12 02:18:00
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