| 查看: 830 | 回复: 0 | ||
[求助]
提取真菌胞内蛋白的方法
|
|
请教各位高人，我想提取木霉的胞内活性蛋白，实验室没有试剂盒，按照几篇文献的方法如下提取： 1. PDA培养基培养3天 2. 300毫克蜗牛酶加入20mlPBS中，伴有DTT50微升，消化离心洗净的菌体5h 3. 将所得物低速离心，去上清，去除蜗牛酶 4. 将沉淀用尿素-碳酸钠溶液冰浴30min后震荡20min（因为尿素会让蛋白变性，而我需要活性蛋白，所以我将这步改为：冰水重悬沉淀，超声20min，8秒间隔，震荡8S） 5. 将所得物低速离心，去除未破碎的菌体，上清理论上应该就是内蛋白 但上清跑蛋白胶后目标组和对照条带基本一致，没有区别，且看不出明显清晰的条带，这个方法明显不行，请问各位高人有什么办法，或者有什么有效的便宜点的试剂盒可以买的，多谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
[急招]吉林大学招收26年9月入学考核制博士生1名，截止今晚24点前
已经有3人回复
-
前几天时间戳更新了
已经有13人回复
-
AASSDDFF
已经有3人回复
-
→_→
已经有3人回复
-
重庆理工大学副校长遇刺身亡 传涉案副教授疑因积怨行凶
已经有6人回复
-
面上项目没有好文章就没希望了吗？
已经有20人回复
-
困死了
已经有8人回复
-
还有课题组有博士名额吗
已经有6人回复
-
博士申请
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
