| 查看: 860 | 回复: 0 | ||
[求助]
提取真菌胞内蛋白的方法
|
|
请教各位高人，我想提取木霉的胞内活性蛋白，实验室没有试剂盒，按照几篇文献的方法如下提取： 1. PDA培养基培养3天 2. 300毫克蜗牛酶加入20mlPBS中，伴有DTT50微升，消化离心洗净的菌体5h 3. 将所得物低速离心，去上清，去除蜗牛酶 4. 将沉淀用尿素-碳酸钠溶液冰浴30min后震荡20min（因为尿素会让蛋白变性，而我需要活性蛋白，所以我将这步改为：冰水重悬沉淀，超声20min，8秒间隔，震荡8S） 5. 将所得物低速离心，去除未破碎的菌体，上清理论上应该就是内蛋白 但上清跑蛋白胶后目标组和对照条带基本一致，没有区别，且看不出明显清晰的条带，这个方法明显不行，请问各位高人有什么办法，或者有什么有效的便宜点的试剂盒可以买的，多谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
朋友圈看到的
已经有7人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有14人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有7人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有4人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有30人回复
-
今天放榜吗？
已经有11人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有7人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有114人回复
-
什么时候开奖？
已经有6人回复
-
结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
