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lushili

新虫 (初入文坛)

[交流] P-NPP法测脂肪酶活力 已有1人参与

各位大神大家好,小弟刚接触到测酶活力这一块,目前打算做脂肪酶活力测定,查阅文献之后选择了P-nPP法来做,遇到了些问题,想请教一下大家。
1、这个反应是不是必须得加入终止液之后,才能测吸光度?
2、如果必须加,计算酶活的时候,终止液的量是不是也得计算在内,如何计算?
查阅文献得到的酶活公式如下,正确吗?
按下式计算酶活: X=cV/(tV′)
式中:
X为脂肪酶活力,U/mL;c为对硝基苯酚浓度,μmol/mL;V为的反应液终体积,mL;V′为酶液的用量,mL;t为作用时间,min。
请各位大神不吝赐教!感激不尽!
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鲤鱼
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novodisk

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
回复讨论:

1.不是必须加终止液才行,有动态反应比色法就不用加终止液,根据反应速率测试酶活,但这种方法你必须有生化分析仪才能做动态测试,限制比较大,另外这种方法还必须有标准酶做标准曲线,一般用对硝基苯酚做标准曲线的,就必须加终止液才行。

2.至于酶活的计算,需要参考酶活的定义才可以。
2楼2018-04-24 13:57:54
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