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王箬竹

新虫 (小有名气)

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[交流] 豌豆VIGS

小虫最近想做一下豌豆的VIGS，实验室没有做过，查了一些文献，在method处都没有详细说明载体上连的CDS取的位置，自己认为是不是最好取3'端的序列？求各位虫友指点迷津

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1楼 2016-03-16 21:52:41

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fmm123

铜虫 (初入文坛)

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(1)  插入的目的基因片段长度最好介于 200～1300 bp 范围；
(2)  所选的目的基因片段最好定位于被沉默基因的中部区域；
(3)  所选的目的基因片段内不应存在多聚型的碱基序列，例如多聚 A、T 等。

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王箬竹

2楼2016-03-17 09:21:50

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star013

新虫 (知名作家)

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这个技术我们可以把你您做的

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3楼2016-03-17 09:41:16

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陈爱中

新虫 (小有名气)

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这个不能不说吧，属于关键数据，不同区域的序列沉默效果都不一样，他用的哪一个肯定要说明。仔细找找

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4楼2016-03-17 09:47:30

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王箬竹

新虫 (小有名气)

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专业: 植物遗传学

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引用回帖:

2楼: Originally posted by fmm123 at 2016-03-17 09:21:50
(1)  插入的目的基因片段长度最好介于 200～1300 bp 范围；
(2)  所选的目的基因片段最好定位于被沉默基因的中部区域；
(3)  所选的目的基因片段内不应存在多聚型的碱基序列，例如多聚 A、T 等。

谢谢指导！
截取片段只定位于中部区，不用考虑是不是保守的序列吗？如果是保守序列会不会可能把同源的其他基因也给沉默？谢谢！

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5楼2016-03-17 11:49:51

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