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jia0472

金虫 (小有名气)

[交流] 关于梯度洗脱

以前没有跑过梯度洗脱,在这想请教大家。现在有两个化合物A和B,B是在A的结构上多了两个H, 我目前的色谱条件是甲醇:水=75:25,结果两个物质几乎在同一位置出峰,不过B比A每次都稍微早了0.2分钟,所以想用梯度洗脱的方法是不是能分开?但是从没跑过,对梯度洗脱不了解,想问大家:如果要设置梯度程序的话,怎么设置?用梯度的方法一定能分开吗?是不是和设定的梯度有关?
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有爱的日子

荣誉版主 (著名写手)

甲醇的比例小一些试试,看你这个情况只有两个化合物要分,应该等度洗脱也能分开。
Love means to share with others.
2楼2008-10-16 23:33:09
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曾展文

至尊木虫 (著名写手)

你的样品等度应该能够分开,梯度主要是针对样品成分比较复杂、且各成分之间极性相差较大的情况,这样可以缩减分析时间,调小甲醇比例试试
3楼2008-10-17 12:01:35
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jia0472

金虫 (小有名气)

什么是等度洗脱?就是不跑梯度,直接换个比例跑?A是倍半萜类化合物,B是它的还原产物
4楼2008-10-17 14:29:19
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dahualu1288

银虫 (正式写手)

不用梯度洗脱应该也能分开
用乙腈比水的流动相试试 或者加点酸加点盐
5楼2008-10-17 19:24:21
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hirose

银虫 (小有名气)

有机相比例减小,应该可以分开
6楼2008-10-17 23:27:41
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jia0472

金虫 (小有名气)

是不是要避开甲醇:水50:50的比例
7楼2008-10-18 10:55:54
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jia0472

金虫 (小有名气)

看了一些东西,有一点不明白,在跑梯度洗脱之前,还要跑空白梯度洗脱吗?是必须的吗?那什么是空白梯度洗脱呢?是跑流动相吗?如果是的话,对于我所用的流动相是甲醇和水75:25,是跑这个吗?真的是不明白,请大家指点
8楼2008-10-18 11:35:15
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jia0472

金虫 (小有名气)

今天用等度洗脱的方法试了甲醇:水=70:30,甲醇:水=60:40均没分开,而且60:40的时候保留时间已经是30分钟了,请问,在这种情况下,用甲醇和水跑梯度的话有没有必要?
9楼2008-10-19 16:12:38
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