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brassica227铁虫 (小有名气)
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[交流]
植物DNA甲基化水平测定的方法
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| 我急需要测定植物DNA甲基化水平的方法，不知道哪位有这方面详细的protocol或者权威文献？ |
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mhb828
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6楼2008-10-19 18:58:49
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brassica227(金币+5):xie xie4
brassica227(金币+5):xie xie4
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如果你想定量研究，那么用BSP（bisulfite PCR） 用重亚硫酸盐处理DNA样品，甲基化的C保持不变，而非甲基化的C变成了U 通过PCR，然后测序，就知道哪个位点发生了甲基化 还有就是甲基化敏感的酶切，用甲基化敏感和不敏感的酶分别切DNA，然后PCR 能够P出来就是没切断，有甲基化，P不出来就是切断了，当然前提是你要研究的片段存在甲基化敏感的酶切位点 还有HPLC法。用DNA酶消化基因组，变成一个一个的单核苷酸。因为甲基化的C和非甲基化的C在柱子的移动速度不一样，就会出现不同的峰，算一下比值就知道全基因组的甲基化水平 |
4楼2008-10-17 09:54:56
