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对细菌的一个特别重要的基因进行点突变，不能先敲除。请高人指点。
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| 对细菌的一个特别重要的基因进行点突变，不能先敲除。请高人指点。想对细菌的一个特别重要的基因5‘端进行一个氨基酸的点突变，如果能先敲除就好了，把点突变的重新整合进去就行了，可我这个偏偏很重要。另外点突变的基因如果转入细菌，那也得连接个筛选标记吧，这个基因就1Kb, 下游再连接个抗生素基因，怎么保证交换发生在5’？万一交换发生在3‘端，虽然有抗性还是没有真正发生突变啊。 |
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