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学术小乞丐

新虫 (初入文坛)

[求助] WB菜鸟,求助各位大神!!! 已有3人参与

本人小硕一枚,最近一直在跑western,每次跑内参都能出来,但目的蛋白一直都出不来,我尝试着换了5-6个不同抗体,所有抗体都是进口的,却都没有跑出来过,请教各位大神到底是哪里有问题,在下感激不尽!
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小雷想

铁虫 (正式写手)

丽春红染一下膜,看看相应位置有没有条带,有的话说明转上了,可能是抗体原因,没有的话可能是没转上,或者你检测的蛋白在你的样品中不表达或表达量低

发自小木虫Android客户端
5楼2016-03-12 09:01:07
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普通回帖
2楼2016-03-11 21:24:51
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+2, 有帮助 2016-03-13 22:22:56
本帖内容被屏蔽

3楼2016-03-11 22:47:15
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学术小乞丐

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-03-11 22:47:15
你的蛋白分子量多大?

上至200,下至20,都跑了,都没出来,内参却都出来了
4楼2016-03-12 08:54:33
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star013

新虫 (知名作家)


6楼2016-03-12 09:45:40
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小y080253

新虫 (初入文坛)

是不是上样量太少了 试着加大上样量

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-03-12 11:49:12
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jipu

铁杆木虫 (知名作家)

8楼2016-03-12 12:01:50
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一念执着00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-13 22:22:48
你先试试凝胶电泳,看看你的目的蛋白有没有提取成功,目的蛋白是不是能被凝胶电泳检测,如果不能被检测,那么很可能是你的目的蛋白提取不充分,没有到达检测限!祝你好运!

发自小木虫Android客户端
9楼2016-03-12 12:17:45
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+8, ★★★很有帮助 2016-03-13 22:22:31
1、可能目的蛋白表达量低,远远低于内参的量;
2、你确定一抗和二抗是否匹配?
10楼2016-03-13 20:09:03
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