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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » WB菜鸟，求助各位大神！！！
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学术小乞丐

新虫 (初入文坛)

[求助] WB菜鸟，求助各位大神！！！ 已有3人参与

本人小硕一枚，最近一直在跑western，每次跑内参都能出来，但目的蛋白一直都出不来，我尝试着换了5-6个不同抗体，所有抗体都是进口的，却都没有跑出来过，请教各位大神到底是哪里有问题，在下感激不尽！
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1楼 2016-03-11 21:15:36
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小雷想

铁虫 (正式写手)
丽春红染一下膜，看看相应位置有没有条带，有的话说明转上了，可能是抗体原因，没有的话可能是没转上，或者你检测的蛋白在你的样品中不表达或表达量低

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5楼2016-03-12 09:01:07
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普通回帖

zhifang889
。。

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2楼2016-03-11 21:24:51
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+2, ★有帮助 2016-03-13 22:22:56
本帖内容被屏蔽
3楼2016-03-11 22:47:15
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学术小乞丐

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-03-11 22:47:15
你的蛋白分子量多大？

上至200，下至20，都跑了，都没出来，内参却都出来了
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4楼2016-03-12 08:54:33
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star013

新虫 (知名作家)
我们可以帮您做。啊

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6楼2016-03-12 09:45:40
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小y080253

新虫 (初入文坛)
是不是上样量太少了 试着加大上样量

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7楼2016-03-12 11:49:12
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jipu

铁杆木虫 (知名作家)
多上样试试看吧

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8楼2016-03-12 12:01:50
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一念执着00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-13 22:22:48
你先试试凝胶电泳，看看你的目的蛋白有没有提取成功，目的蛋白是不是能被凝胶电泳检测，如果不能被检测，那么很可能是你的目的蛋白提取不充分，没有到达检测限！祝你好运！

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9楼2016-03-12 12:17:45
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
学术小乞丐: 金币+8, ★★★很有帮助 2016-03-13 22:22:31
1、可能目的蛋白表达量低，远远低于内参的量；
2、你确定一抗和二抗是否匹配？
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10楼2016-03-13 20:09:03
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