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llde

金虫 (正式写手)

[求助] 用HPLC法测定含量，如何确定检测波长，波长扫描图如下，如何确定最大吸收波长 已有3人参与

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1楼 2016-03-11 09:52:25
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ray2317

木虫 (小有名气)

知足者

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by llde at 2016-03-11 14:18:50
药典中选择检测波长215，有机相为乙靖，请问，你说如果选择低波长，不选甲醇的原因是什么呢？药典中为什么选择215呢
...

质子性溶剂，低波长下干扰大，透光性不如非质子性溶剂。所以建议低波长下选择乙腈。
从你的图来看，一般选择220nm左右，所以药典选择215nm很正常。
如果你这个图样品浓度不高的话，选220nm或再高点也没关系。主要看你的供试浓度和峰面积（紫外吸收情况）。
不过既然有药典做参照，还费什么心思。215nm就OK啊。
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药物研发
8楼2016-03-11 15:47:38
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llde

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ray2317 at 2016-03-11 10:21:48
图呢？
测含量一般相对简单，对主物质进行全波长扫描，选择最大或较大的即可，末端波长尽量不要选；然后调流动相，尽量用等度，时间不要太长，一般不超过20min，确保杂质能与主物质分开且不影响下一针就好了。

这是紫外扫描的图谱，如何确定检测波长呢
用HPLC法测定含量，如何确定检测波长，波长扫描图如下，如何确定最大吸收波长
紫外-1-1_看图王.jpg
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4楼2016-03-11 10:44:48
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lengjing147

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by llde at 2016-03-11 14:18:50
药典中选择检测波长215，有机相为乙靖，请问，你说如果选择低波长，不选甲醇的原因是什么呢？药典中为什么选择215呢
...

小于220nm，甲醇的紫外干扰较大。。
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7楼2016-03-11 15:19:45
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普通回帖

llde

金虫 (正式写手)
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[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2016-03-11 10:09:20
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ray2317

木虫 (小有名气)

知足者

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
llde: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-03-11 10:43:19
图呢？
测含量一般相对简单，对主物质进行全波长扫描，选择最大或较大的即可，末端波长尽量不要选；然后调流动相，尽量用等度，时间不要太长，一般不超过20min，确保杂质能与主物质分开且不影响下一针就好了。
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药物研发
3楼2016-03-11 10:21:48
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ray2317

木虫 (小有名气)

知足者

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by llde at 2016-03-11 10:44:48
这是紫外扫描的图谱，如何确定检测波长呢

紫外-1-1_看图王.jpg
...

这是多少浓度?
尽量不要用末端，如果其他波长吸收实在太小，提高供试浓度也不行，那也没办法。看你这个图，似乎要选220nm左右。如果选择过低的波长，有机相就不要用甲醇了，用乙腈吧。
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药物研发
5楼2016-03-11 13:52:54
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llde

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ray2317 at 2016-03-11 13:52:54
这是多少浓度?
尽量不要用末端，如果其他波长吸收实在太小，提高供试浓度也不行，那也没办法。看你这个图，似乎要选220nm左右。如果选择过低的波长，有机相就不要用甲醇了，用乙腈吧。...

药典中选择检测波长215，有机相为乙靖，请问，你说如果选择低波长，不选甲醇的原因是什么呢？药典中为什么选择215呢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2016-03-11 14:18:50
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llde

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ray2317 at 2016-03-11 15:47:38
质子性溶剂，低波长下干扰大，透光性不如非质子性溶剂。所以建议低波长下选择乙腈。
从你的图来看，一般选择220nm左右，所以药典选择215nm很正常。
如果你这个图样品浓度不高的话，选220nm或再高点也没关系。主要 ...

再问一下，你说：从你的图来看，一般选择220nm左右。这句话的依据是什么呢？是经验吗？还是有什么指导原则呀？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2016-03-11 16:17:04
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zkk1222

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
llde: 金币+2, ★有帮助 2016-03-12 23:59:42
看不到图，首先看一下你使用的HPLC的检测器有没有二极管阵列的检测器，如果有的话， 可以通过此检测仪器确定检测波长，如果没有的话，那么我建议你可以进行全波长扫描确定，如果你想偷懒的话，那么我建议你去检索一下文献，看看别人使用什么的波长，你引用后，拿来使用就行了。
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10楼2016-03-12 15:37:32
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