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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果？
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果？

老师们好，请给我指点一下：我用StepOne做种子转基因检测，经常出现荧光强度曲线与CT值不一致，不知道问题出在哪里，曲线图明明就是阳性，可是CT值却是40，我做判定的时候以哪个为主才好呢？另外发现实验室nos终止子的探针引物用完了，我就用纯水稀释，然后加入板中。试验结果：nos终止子出峰线（出现典型扩增曲线），探针引物可经常稀释来用吗？谢谢！
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1楼 2016-03-11 01:12:32
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)
等啊等……

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2楼2016-03-12 04:26:18
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匿名

用户注销 (正式写手)
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3楼2016-03-12 13:28:15
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你太善良

新虫 (著名写手)
什么曲线？ct大于35不靠谱。除非实验室很流弊。

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4楼2016-03-13 16:12:03
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 周游1166 at 2016-03-12 13:28:15
曲线图是溶解曲线么？  那个只是检测你的扩增产物是不是单一罢了 没有任何价值 而CT大于35应该就是无效的了

曲线图是探针荧光基团在扩增的过程中形成的抛物线轨道，如果是阴性就是不规则不连续的线。

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5楼2016-03-19 07:15:58
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mumu_w2015 at 2016-03-19 07:15:58
曲线图是探针荧光基团在扩增的过程中形成的抛物线轨道，如果是阴性就是不规则不连续的线。
...

抛物线越高，荧光强度越大，对应ct值做判断的。

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6楼2016-03-19 07:17:44
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by mumu_w2015 at 2016-03-11 01:12:32
老师们好，请给我指点一下：我用StepOne做种子转基因检测，经常出现荧光强度曲线与CT值不一致，不知道问题出在哪里，曲线图明明就是阳性，可是CT值却是40，我做判定的时候以哪个为主才好呢？另外发现实验室nos终止子 ...

一条直线贯穿，一般都是出现在终止子nos上，不知道什么原因。
荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果？


荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果？-1



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7楼2016-03-19 07:22:14
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