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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果?

老师们好,请给我指点一下:我用StepOne做种子转基因检测,经常出现荧光强度曲线与CT值不一致,不知道问题出在哪里,曲线图明明就是阳性,可是CT值却是40,我做判定的时候以哪个为主才好呢?另外发现实验室nos终止子的探针引物用完了,我就用纯水稀释,然后加入板中。试验结果:nos终止子出峰线(出现典型扩增曲线),探针引物可经常稀释来用吗?谢谢!
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

2楼2016-03-12 04:26:18
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
3楼2016-03-12 13:28:15
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你太善良

新虫 (著名写手)

什么曲线?ct大于35不靠谱。除非实验室很流弊。

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4楼2016-03-13 16:12:03
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 周游1166 at 2016-03-12 13:28:15
曲线图是溶解曲线么?  那个只是检测你的扩增产物是不是单一罢了 没有任何价值 而CT大于35应该就是无效的了

曲线图是探针荧光基团在扩增的过程中形成的抛物线轨道,如果是阴性就是不规则不连续的线。

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5楼2016-03-19 07:15:58
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mumu_w2015 at 2016-03-19 07:15:58
曲线图是探针荧光基团在扩增的过程中形成的抛物线轨道,如果是阴性就是不规则不连续的线。
...

抛物线越高,荧光强度越大,对应ct值做判断的。

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6楼2016-03-19 07:17:44
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by mumu_w2015 at 2016-03-11 01:12:32
老师们好,请给我指点一下:我用StepOne做种子转基因检测,经常出现荧光强度曲线与CT值不一致,不知道问题出在哪里,曲线图明明就是阳性,可是CT值却是40,我做判定的时候以哪个为主才好呢?另外发现实验室nos终止子 ...

一条直线贯穿,一般都是出现在终止子nos上,不知道什么原因。
荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果?


荧光定量PCR曲线与CT值哪个更好判定结果?-1



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7楼2016-03-19 07:22:14
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