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ljwei_163

金虫 (正式写手)

[交流] 求助:植物总RNA提取需要注意什么问题?

RT
金币不多
谢谢
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ljwei_163

金虫 (正式写手)

提取结果总是不理想  RNA降解严重  太受打击了
请高人指点
2楼2008-10-15 16:51:49
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shenye.judy

木虫 (正式写手)

先讲讲你是用什么方法的?试剂盒?trizol?ctab?等
3楼2008-10-15 17:00:36
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hanjun80

金虫 (正式写手)

除RNA酶务尽……

务尽啊!!!
我笃信:人定胜天!
4楼2008-10-15 19:07:54
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shmimy

铜虫 (小有名气)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):总结的很详细,3Q`
首先,你要确定你用的管子和枪头都是RNase free的,就是都用DEPC处理过的,这是很重要的,你用的试剂也是提RNA专用的,不要跟其他的混了,
提之前最好沐浴更衣一下,然后要带口罩,不要说话,其实这些都是次要,因为样品在管子里只要你不是故意的朝管子里喷唾液就没关系,还有就是更加重要的是磨样这一步,就是你的样再磨的过程中一定要在液氮中
绝对不能明显看到样品化掉,还有如果你用的是Trisol提的话,一毫升Trisol加入的样品不能太多,就是不能看到加入样品后Trisol的颜色变化.
5楼2008-10-15 19:11:16
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hwd6218554

金虫 (著名写手)

最好在冰上操作,带口罩,操作速度要快一点
6楼2008-10-15 20:50:27
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ljwei_163

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by shenye.judy at 2008-10-15 17:00:
先讲讲你是用什么方法的?试剂盒?trizol?ctab?等

用的试剂盒 OMEGA产的e.Z.N.A plant RNA MAXI Kit
7楼2008-10-16 08:20:32
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谢谢分享!
8楼2008-11-18 17:57:36
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断弦的琴

铁虫 (小有名气)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
确保 在加提取液之前样品一直处于冰冷状态,加了 提取液就好了
不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
9楼2008-11-19 16:05:48
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xuedan0721

铜虫 (小有名气)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
前期的处理很关键,确保所有用到的试剂材料都没问题,磨样过程要迅速.
10楼2008-11-19 16:49:35
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