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馨er

木虫 (著名写手)

儿科主任医师

[交流] 基因测序中的问题求教

我在做基因测序,发现一个这样的问题,foward怎么测也不不好,但是reverse也只能测一半。而PCR结果很漂亮。我很郁闷,希望帮助!谢谢!!!
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wolong1984

银虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-3 10:50
你是用pcr产物直接测得么?建议转化后用菌去测,这样结果可能会好些!
2楼2008-10-17 22:32:11
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馨er

木虫 (著名写手)

儿科主任医师

非常感谢!我是用pcr产物直接测得,但是一直都很好,最近出现的。其中一个exon已经才了70多个都很好,现在有一个出现这样的问题,无论pcr结果多漂亮,reverse也只能测一半,forward测不了。难道是dna模板本身在这个exon有问题?谢谢,请多指教!
宠辱不惊闲观庭前花开花落,去留无意漫随天外云卷云舒
3楼2008-10-22 14:37:56
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-3 10:49
测序结果好坏与电泳的条带漂亮与否关系不大
检查PCR模版吧
测序可能出现套峰才导致无法测通
如果不行,建议进行克隆测序
4楼2008-10-22 21:55:13
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馨er

木虫 (著名写手)

儿科主任医师

非常感谢!!!好的,我检查模板!
宠辱不惊闲观庭前花开花落,去留无意漫随天外云卷云舒
5楼2008-10-24 17:29:30
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