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生科深似海

新虫 (小有名气)

[交流] WB

第一个问题:做WB时一抗可以在block时加吗?为什么?在什么情况下?     
第二个问题:一看和二抗孵育以后可以做WB吗?为什么?

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生科深似海

新虫 (小有名气)

不好意思 !一抗和二抗,不是一看。

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2楼2016-03-09 22:03:25
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Luse_91

新虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
生科深似海: 金币+1 2016-03-10 09:46:48
你在block时也可以加一抗啊,但是你有这么多的抗体吗,一抗那么贵。一抗也是用block时的稀释液配的,一抗过程中也在封闭,封闭室温就1h就OK了,也不费时

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念只念那相遇的一瞬间为你把时空穿越怨莫怨这含泪的一双眼转眼间沧海桑田念的怨的都说爱是自己的信念翻云手手中月聚了散了才知缘是凡心一点
3楼2016-03-09 22:34:03
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Luse_91

新虫 (著名写手)


生科深似海: 金币+1 2016-03-10 09:46:40
一抗二抗之后就看你自己做什么了,目的条带没有交叉的可以膜再生然后再敷其他抗体也是OK了,但是如果是有交叉,或者两个跳到离很近的话,就不行

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念只念那相遇的一瞬间为你把时空穿越怨莫怨这含泪的一双眼转眼间沧海桑田念的怨的都说爱是自己的信念翻云手手中月聚了散了才知缘是凡心一点
4楼2016-03-09 22:35:46
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Liumengya

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
生科深似海: 金币+1 2016-03-10 09:46:28
看似可以,其实是不行的。还是一步一步来比较好……

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5楼2016-03-09 22:43:48
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生科深似海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Luse_91 at 2016-03-09 22:35:46
一抗二抗之后就看你自己做什么了,目的条带没有交叉的可以膜再生然后再敷其他抗体也是OK了,但是如果是有交叉,或者两个跳到离很近的话,就不行

我是指一抗先和二抗孵育,再去孵育pvdf膜,最后显影效果会好吗

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6楼2016-03-10 09:44:15
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生科深似海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Luse_91 at 2016-03-09 22:34:03
你在block时也可以加一抗啊,但是你有这么多的抗体吗,一抗那么贵。一抗也是用block时的稀释液配的,一抗过程中也在封闭,封闭室温就1h就OK了,也不费时

block时加一抗,一抗会不会非特异性吸附,造成背景很黑?

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7楼2016-03-10 09:45:40
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zuiaixuexi

至尊木虫 (文坛精英)


生科深似海: 金币+1 2016-03-10 09:57:27
祝  好 运 !
至乐之声唯孝悌,美羹有味是诗书。
8楼2016-03-10 09:50:09
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xujinglong06

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议先封闭,脱脂奶粉的TBST溶液,然后再一抗4度过夜,这样是省抗体的,二抗曝光后如果和曝光条带靠得不远  建议重新做,如果分得很开就可以再一抗、二抗曝光。
9楼2016-03-10 10:31:22
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Luse_91

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 生科深似海 at 2016-03-10 09:44:15
我是指一抗先和二抗孵育,再去孵育pvdf膜,最后显影效果会好吗
...

这么好奇的话你可以试试啊

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念只念那相遇的一瞬间为你把时空穿越怨莫怨这含泪的一双眼转眼间沧海桑田念的怨的都说爱是自己的信念翻云手手中月聚了散了才知缘是凡心一点
10楼2016-03-10 20:37:32
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