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请教核酸适体结合靶物质的条件~~~
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最近在做核酸适体检测靶物质的实验,可是适体与靶物质的结合能力太弱,想请教各位大牛是什么原因呢。 实验检测原理是:荧光标记的适体与靶物质、纳米材料(有猝灭作用)反应,根据有无荧光判断有无靶物质。 我的具体操作是:50nM适体与2倍体积的100nM毒素在30摄氏度下恒温振荡40分钟后,加入纳米材料,30摄氏度下恒温振荡40分钟后,离心测荧光强度。 按理说靶物质与适体结合后,不再与纳米材料反应,即不被猝灭。可是我做的实验不管有无靶物质,荧光都被猝灭了,我推测应该是适体与靶物质没结合好,想问问适体与靶物质结合都需要什么条件呢?或者哪个操作环节出错了呢?希望大家可以多提宝贵建议!!生物小白先谢过了! |
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