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zhouhai2015

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好,我最近用气质联用测鱼组织里的脂肪酸,买了37种混标...已有3人参与

老师您好,我最近用气质联用测鱼组织里的脂肪酸,买了37种混标(每种含量已知),我可不可以直接用混标配成不同梯度浓度,对每种我要测的脂肪酸做个标准曲线,用这标准曲线来定量呢?如果我有内标的话,改怎么定量呢? @lovibond

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先生的科学

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhouhai2015(99503102代发): 金币+2, 回帖很精彩,谢谢应助! 2016-06-30 11:14:17
可以用混标来做标准曲线的,就叫做外标法,用60m的柱子,应该就能分开。脂肪酸做的太多了,你搜一搜文献应该就有很多,什么微生物代谢中的,土壤等等,叔丁基甲基醚作溶剂,甲酯化就可以。
内标法的话就要选择一种内标物,内标物最好和分析的样品组分有基本相同或尽可能一致,做标准曲线时,就是外标的峰面积比上内标的峰面积,然后跟浓度做标曲。内标更标准,因为它可以尽可能避免样品基质的影响,不过一般外标法就可以。
共同进步
7楼2016-03-08 17:07:52
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niekun0557031

木虫 (文坛精英)

内标除以外标面积的比值定量,标曲根本不用做,

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2楼2016-03-08 05:45:41
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhouhai2015(99503102代发): 金币+2, 回帖很精彩,谢谢应助! 2016-06-30 11:14:09
第一、可以的用混标来做标准曲线的,一般采用外标法,峰要分开。有标准品就用外标就好。
第二、内标法(Internal Standard Method)是色谱分析中一种比较准确的定量方法,尤其在没有标准物对照时,此方法更显其优越性。内标法是将一定重量的纯物质作为内标物(参见内标物条)加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按公式即可求出被测组分在样品中的百分含量。
第三、采用内标法定量时,内标物的选择十分重要。内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。
既往不恋,纵情向前!
3楼2016-03-08 08:21:38
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zhouhai2015

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shenyingbin at 2016-03-08 08:21:38
第一、可以的用混标来做标准曲线的,一般采用外标法,峰要分开。有标准品就用外标就好。
第二、内标法(Internal Standard Method)是色谱分析中一种比较准确的定量方法,尤其在没有标准物对照时,此方法更显其优越性 ...

谢谢老师的回答!
如果我用混标做标准曲线的话,这个浓度梯度有没有个好的建议呢?  我买的是25mg的混标里面还有37种脂肪酸,不是单标!
如果我用内标法的话,我存在两个问题:第一,准确称量问题,内标物质我可以准确称量,但待测样品在甲酯化前可以准确称出来,甲酯化之后用正己烷萃取出来,怎么去称它的质量?  第二,这个相对校正因子需要自己测么?

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4楼2016-03-08 09:50:27
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