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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 关于内标法测定脂肪酸含量的问题？
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一字腾云

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于内标法测定脂肪酸含量的问题？ 已有2人参与

1.我买了37种混标和C19内标物，能不能用只用这37种混标和内标做内标标准曲线，如果可以该如何做？
2.买了混标就一定能定性分析了吗，比如即使用GC-MS也只确定是C18，但是不能确定C18：1或C18：2吧，买混标厂家给的脂肪酸出峰顺序和保留时间只是在他们柱子和气相条件下出来的结果，气相柱不同和气相条件不同就不能保证出峰顺序跟厂家给的一样吧，那怎么定性呢？
3.买的是NU-CHEK公司的混标和内标物，用什么溶剂稀释才好呢，因为看文献有用正己烷，有用庚烷，不同的文献有各种溶剂稀释，该以哪个为准呢？
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1楼 2016-03-07 17:21:14
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
一字腾云(mouse103代发): 金币+2 2016-03-09 09:11:52
1、37种混标只能用于定性，除非供应商提前给你把混标的含量给你标示好了，不然只有内标物质你的校正因子没法计算，
2、买了混标可以用于定性分析，GC-MS，是EI源，可以通过碎片来区分C18：1或C18：2
3、只要不影响检测的溶剂都可以，不过一般选不易挥发的可能会更好一些
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一字腾云
2楼2016-03-07 21:31:06
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一字腾云

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-07 21:31:06
1、37种混标只能用于定性，除非供应商提前给你把混标的含量给你标示好了，不然只有内标物质你的校正因子没法计算，
2、买了混标可以用于定性分析，GC-MS，是EI源，可以通过碎片来区分C18：1或C18：2
3、只要不影响 ...

是提前把混标的含量发给我了，谢谢你，我想通过混标和内标物做内标标准曲线，那我是不是应该先把内标物添加到待测样品中摸索出添加内标物合适的量再做混标和内标（跟样品组分中间峰面积或最大峰面积80%的量）的曲线，还有买来的标品都是像医院打针的瓶子，敲碎了就要全部溶解，溶解后放在什么瓶子里冷冻保藏才好呢，脂肪酸甲酯挥发很严重呀
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3楼2016-03-08 10:53:13
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一字腾云 at 2016-03-08 10:53:13
是提前把混标的含量发给我了，谢谢你，我想通过混标和内标物做内标标准曲线，那我是不是应该先把内标物添加到待测样品中摸索出添加内标物合适的量再做混标和内标（跟样品组分中间峰面积或最大峰面积80%的量）的曲线 ...

嗯，标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的，一般都是取样以后定容到容量瓶中，一般都是溶剂挥发比较严重，脂肪酸甲酯没那么容易挥发的
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4楼2016-03-08 13:07:48
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一字腾云

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-08 13:07:48
嗯，标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的，一般都是取样以后定容到容量瓶中，一般都是溶剂挥发比较严重，脂肪酸甲酯没那么容易挥发的...

你能具体解释一下“标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的”这句话什么意思吗，怎样才能大致确定样品中含量，通过加内标物先大致估算？
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5楼2016-03-08 21:19:25
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一字腾云 at 2016-03-08 21:19:25
你能具体解释一下“标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的”这句话什么意思吗，怎样才能大致确定样品中含量，通过加内标物先大致估算？...

因为你的样品的含量要落在你设计的标准曲线范围内，你的标准曲线才有意义，所以说“标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的”，你有外标对照，一般可以先可以先用外标法估算一下
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6楼2016-03-08 21:37:10
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duliyu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这里感觉你是思考偏了

首先gc-mc可以定量是不假，但那时对应的化合物必须相同的情况才可以，比如定量油酸你采用油酸标准品进行定量这样是可以的；
其次，再来说说混标，混标就是正构烷烃从甲烷到碳30己烷不等的混合物，而脂肪酸是什么，酸啊怎么可能用来定量
再次，脂肪酸采用gc-ms一般就是采用软件分析总离子流图并鉴定各个峰所对应的化合物，同时系统还可以提供相对百分含量，及保留时间。
最后混标作用是按照检测样品的条件进样，并利用混标的保留时间来计算样品中化合物的保留指数的，说白点就是混标就是吧检测到的化合物物理参数标准化一便于统一比较
一般而言同意化合物保留指数相差无几
仅此而已
ps  国内论文一般仅需要保留时间就行了，这也是做学问不严谨的一点，像英文文章必须采用保留指数
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守候之戒
7楼2016-03-10 11:33:25
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-08 21:37:10
因为你的样品的含量要落在你设计的标准曲线范围内，你的标准曲线才有意义，所以说“标准曲线的浓度的选择是要根据样品中的含量来设计的”，你有外标对照，一般可以先可以先用外标法估算一下...

补充一点，在建立外标法时，也可以同时建立内标方法，确定37种物质与内标物的校正值。以后，就可以任意选择分析方法。
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8楼2016-03-10 16:11:15
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zss_why

新虫 (初入文坛)
内标法测脂肪酸含量，怎么操作呢？有没有公式哇？内标物质是c13

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努力学习，多问多看多想
9楼2016-03-15 11:45:27
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