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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

[求助] 细胞培养 已有1人参与

最近实验室很多人用CLARK胎牛血清(2.5%)养HepG2、MCF-7等细胞,黑胶虫严重爆发,MCF-7细胞还伴随着染菌状况。更换Gibco小牛血清(10%),虫子就不会爆发。但是CLARK的血清养HeLa细胞就没用问题,培养液与细胞状态都很好,这到底是不是血清问题呢?
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肖宇心

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2012csc: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-21 13:09:36
对于“黑胶虫”的处理方法:
首先,血清买回来灭活前冻融应逐级冻融,即按照-20℃——4℃完全融化后,再置入水浴中,与室温一起升高到56度,这样的目的是避免温度骤变,导致血清中的营养物质丧失活性。
第二,血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装,尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。
第三,细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%,但如果血清冻融次数过多,那营养物质丧失活性,按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分,故培养基配置时一般用18%-20%的血清。
2楼2016-03-21 12:22:32
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖宇心 at 2016-03-21 12:22:32
对于“黑胶虫”的处理方法:
首先,血清买回来灭活前冻融应逐级冻融,即按照-20℃——4℃完全融化后,再置入水浴中,与室温一起升高到56度,这样的目的是避免温度骤变,导致血清中的营养物质丧失活性。
第二,血清 ...

怎么感觉血清越多黑点越多~而且“黑胶虫”爆发应该就是血清的问题吧~而且养不同的细胞HeLa就没有~其他细胞都有~
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3楼2016-03-21 13:15:07
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