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夏小圈

新虫 (初入文坛)

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[求助] 分离泛素酵母双杂交已有1人参与

有没有人做过分离泛素酵母双杂交啊，完全不知道怎么下手啊啊啊啊啊，我要做四个蛋白互作，都是跨膜的

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1楼 2016-03-07 14:20:39

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hibiosci

新虫 (初入文坛)

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这个有专门的系统的，膜蛋白酵母双杂交文库系统，现在试剂盒厂家停产了，所以只能找公司做，我们之前找上海的一家叫上海海科生物的做过几个膜蛋白酵母双杂交文库，效果挺好的。

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2楼2016-07-03 20:19:19

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yukdhh

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【答案】应助回帖

★ ★
drwhoknowss: 金币+2, 鼓励交流 2018-02-08 03:53:54

我们实验室专门做泛素分裂的酵母双杂交，载体时我们导师自己改造的，构建方法是通过酵母自身的同源重组，操作步骤和一般的酵母双杂交是一样的。还有菌株是很重要的，我们用的是L40菌株，而且还自己改造过，降低了背景表达。

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3楼2018-02-06 16:00:57

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yukdhh

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引用回帖:

3楼: Originally posted by yukdhh at 2018-02-06 16:00:57
我们实验室专门做泛素分裂的酵母双杂交，载体时我们导师自己改造的，构建方法是通过酵母自身的同源重组，操作步骤和一般的酵母双杂交是一样的。还有菌株是很重要的，我们用的是L40菌株，而且还自己改造过，降低了背 ...

也可以检测跨膜蛋白的，因为其中一个载体表达的蛋白就是膜蛋白。

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4楼2018-02-06 16:02:23

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