应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 【新手】DNS法测α淀粉酶 抑制实验 反应进程曲线遇到问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1995  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

RX_豆丁

铁虫 (正式写手)

[求助] 【新手】DNS法测α淀粉酶 抑制实验 反应进程曲线遇到问题

本人是个酶方面的新手，想做某种物质对淀粉酶的抑制作用，这是第一次，采用的是DNS法测定产物糖的方法。
① 我想先做反应进程曲线，确定合适的酶活和反应时间。
      a.  预实验，1%的淀粉浓度，我选取了0.1浓度的酶，结果1-6min的OD值都是在0的上下浮动，我怀疑是淀粉酶失活了，或者浓度太低了（酶溶液一开始不懂，放在了冷藏一晚上，估计失活了）
     b.于是，我配置了1浓度的酶，然后配置完成立刻去测定，从1-10min的OD值都是0.5左右波动
     c. 我蒙圈了，嗯，可能是酶浓度太大了，所以反应很快，1min之内就把所有淀粉都反应成了糖。于是，我配置了0.6和0.3的浓度的酶，测定1-6min的OD值变化，然后0.3的不知道为什么是乱七八糟的，0.6的结果还行，1min的时候是0.2左右，但是从2min开始之后就全部都是0.5左右。
     d.让我很奔溃，合适的酶浓度和反应时间，到底怎么才能准确的测定出来，我的问题到底出在那里？？？

② 看文献，有的测定一种物质对淀粉酶得抑制，做了阴性、阳性和空白对照，可是有的实验就没有阳性对照，一定要做吗？
③ 看文献，有一篇文献的抑制剂是有有机溶剂溶解的，就是水和乙醇一定比例，那我在想，乙醇不会对酶的活性产生影响吗？这篇文章科学么，居然做出来，结果很好，而且还发表了！

求大神帮忙，我是试了好多还不出满意结果，感觉奔溃了！
回复此楼

» 猜你喜欢
考上研究生的都是神
1楼 2016-03-05 15:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

RX_豆丁

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyicheng at 2016-03-11 16:11:03
请问你是用96孔板测的吗？做酶抑制反应得注意操作条件和加样顺序啊，先把底物和缓冲体系全部加好，最后再加酶。

用的分光光度，穷的没有酶标仪……
赞一下 回复此楼
考上研究生的都是神
10楼2016-03-11 17:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

之何的那片天

新虫 (初入文坛)
系统自动识别
识别失败


发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2016-03-10 15:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

RX_豆丁

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 之何的那片天 at 2016-03-10 15:52:48
识别失败

哇，还能发语音，但是为什么是识别失败，听不了，哭，难道要用个手机客服端么
赞一下 回复此楼
考上研究生的都是神
3楼2016-03-11 10:09:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyicheng

铜虫 (正式写手)
请问你是用96孔板测的吗？做酶抑制反应得注意操作条件和加样顺序啊，先把底物和缓冲体系全部加好，最后再加酶。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-03-11 16:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +15 leaflight 2026-03-24 15/750 2026-03-30 10:54 by 1172367218
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +6 nhj_ 2026-03-25 6/300 2026-03-30 10:52 by 唐沐儿
[考研] 282求调剂 +4 wcq131415 2026-03-24 4/200 2026-03-30 10:39 by Delta2012
[考研] 307求调剂 +9 超级伊昂大王 2026-03-24 10/500 2026-03-29 20:26 by 永字号
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 312，生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭