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| 您好～前辈 我用的hek293细胞，培养于6孔板，细胞长到70%左右加入我的药品一种真菌毒素 5和7两个梯度。6h 后，细胞有微弱药效，抽掉孔中10%Dmem,加200微胰酶消化，细胞呈块落下后加10%deme终止消化。分别抽出到15ml离心管，2000转5min,抽出dmem 分别加1ml pbs。2000转5min。避光抽出pbs再各加浓度为25微摩的无血清Dcf孵育液2ml。锡纸包好放入37度培养箱，30min,每10min颠倒摇晃。30min后，2000转5min,抽掉孵育液后各加2ml PBS,2000转5min,抽出pbs再各加0.5ml pbs重悬转入流式管。请问有什么问题吗 为什么流式测出的峰，永远在一起，阳性对照（提前2h加入150微摩的过氧化氢）也测不出 有没有可能加药后探针载不进去 麻烦各位前辈啦～ |
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