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beibeima

新虫 (初入文坛)

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专业: 细胞增殖、生长与分化

[交流] 伤口愈合/细胞划痕实验新方法分享已有2人参与

创伤愈合（Wound healing）是创伤后人体皮肤和表皮组织再生的自然过程。正常来说，皮肤的表皮（最外层）和真皮（内部或深层）存在于一个平衡的状态，以形成一个保护伤口的屏障。而当焦痂破裂，正常的伤口愈合过程便会迅速地开始。

其基本过程包括以下阶段：①止血期、②炎症期、③增生期、④成熟及重塑期。

细胞划痕实验是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。

基本步骤：1. “划痕”的制造，2. 细胞迁移期间图像的获得，3. 后期数据的处理。

传统实验方法：
细胞融合后，用枪头在细胞层表面制造划痕
实验方法缺陷：
1.人工制造的“划痕”很难保证一致性，重复性差；
2.手动划痕可能会划伤培养器皿表面的包被，进而影响实验结果。

ibidi 实验方法：
培养插件

生物相容性硅胶制成的插件，可产生确定的500μm “划痕”区域。

适合于伤口愈合实验，细胞迁移实验，2D侵袭和共培养。
操作步骤：

其他应用：
1. 二维侵袭实验：

2. 共培养：

特点：
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。
4. 研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。
ibidi 培养插件与传统划痕实验比较
ibidi 培养插件提供重复性更好的实验结果

实验结果分析
数据采集：
显微镜用于评估伤口愈合的过程。根据你的关注点和兴趣，不仅可以视频显微镜，还可以进行定点的成像观察。ibidi加热与孵育系统可以直接在培养的条件下进行活细胞成像，不用将样品反复的从孵育室移至显微镜上。

伤口愈合成像分析– WimScratch

是一个伤口愈合和细胞迁移实验的成像分析软件
1. 全面解决伤口愈合实验-从样品准备到成像分析只需要几步
2. 客观的和可再生分析
3. 简单并且快速的数据处理-几分钟出结果
4. 不需要额外的硬件或者软件

WimScratch 自动分析实验结果
WimScratch是基于网站的自动化分析平台，无需任何软件和硬件，只要将图片上传到数据分析平台，几分钟之后结果就可以发送到注册邮箱。

分析数据包括：
a) 细胞覆盖面积
b) 终止速度（平均≥5个图像）
c) 加速特征（平均≥5个图像）
d) 概览图
e) 中间接合处的近似值（平均≥5个图像）

ibidi的伤口愈合成像分析解决方案可以评估细胞迁移，仅仅通过4步就可以得到结果。