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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 切胶回收纯化的DNA浓度太低不能用于连接载体，请教如何提高DNA浓度
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hanyu426980

新虫 (初入文坛)
建议：高保真酶pcr循环数可以调高一点，多做一些大孔回收，一般pcr产物50到100微升回收后效果就很不错了，还有如果回收用的无菌水建议重新灭菌后使用，用buffer的话可以适当加温回收，溶胶时胶块一定要溶解
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11楼2016-02-29 14:12:54
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sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pcr纯化后做模板的话 不要加太多 50微升体系的话加20ng就够了，PCR跑完以后，上样3ul看看条带位置对不对，条带单一不单一，如果单一的话 将剩下的PCR产物用PCR清除试剂盒回收 比胶回收效果好很多
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很给力
12楼2016-02-29 16:45:49
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

试试用回收后的产物做模板，再次扩增
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发展才是硬道理！
13楼2016-03-02 19:15:38
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叶伟12

新虫 (初入文坛)
pcr之后电泳目的条带偏高一点是正常的

发自小木虫IOS客户端
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14楼2016-03-02 21:49:54
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核桃气味

新虫 (小有名气)
请问PCR产物纯化后，为什么条带位置与纯化前不太一致呢？
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15楼2018-04-09 21:06:10
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核桃气味

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 叶伟12 at 2016-03-02 21:49:54
pcr之后电泳目的条带偏高一点是正常的

请问为什么会这样呢？
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16楼2018-04-09 21:07:47
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