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关于HIV实验问题
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大家好，我是做HIV病毒药理学的新生，之前做过药化相关的工作，现在借公派出国联合培养的机会到美国学习生物活性测试。 从前，我从未做过生物病毒相关的工作，现在要做HIV，我心里特别紧张，有些细节的问题，想要问问大家。 首先，老师说出于安全的考虑，要求我使用cotransfection假病毒，我现在使用的是detaEve R9和dataGPVV R8bal，还有HIV-GFP和dataPPVV R8bal共转染的两种病毒，理论上假病毒没有感染性，但我不知这为什么是假病毒，心里还是很紧张，求大家帮我解释这个问题。我听说在第二代病毒繁殖的时候，两段转染的质粒，只有没有包膜的那一段会包在第二代病毒中，所以病毒没有感染力，是这样的么？如果我在做生物活性测试的时候，不需要进行多重感染，是不是可以永远用假病毒呢？ 再有，我们在做病毒感染实验的时候，在拿96孔板的时候，或许会有少量培养基跳到盖子上，也可能在加病毒的时候，由于手抖，少量培养基滴在两空中间，在使用细胞裂解液处理病毒时，只是杀死了孔里的病毒，在显微镜下也只是确认里面的细胞全部裂解，无意中落在外边的会不会存在安全问题？包括在使用流式细胞仪检测GFP病毒时，我们使用多聚甲醛，处理细胞，但放在冰箱里过夜后，我把细胞病毒拿出来，发现管子外侧有少量培养基，不知是不是我在加病毒的过程中无意滴上的，还是我在拿出时晃动溅上的，这样的操作会不会有安全问题？求大家帮我解释一些。 说实话，我现在HIV实验室，就觉得整个人都不好了，其实大家和我说，这就是微生物实验，HIV病毒较其他病毒来讲，感染性很低，传播途径简单，但我就是很怕，也不知自己是不是真的不适合做这实验。求各位师兄师姐开导，谢谢大家了。 |
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