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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 克隆带有HA标签的融合蛋白，目的基因的ATG是否要保留？
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)

[交流] 克隆带有HA标签的融合蛋白，目的基因的ATG是否要保留？ 已有1人参与

请教各位前辈，我要克隆一个目的基因，想在其N端加上一个HA标签，设计克隆引物的时候我的目的基因ATG是否需要保留？如果没有保留会不会对目的基因的表达产生影响？
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1楼 2016-02-27 08:18:32
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果载体上插入位点前有了起始密码子，就可以去掉。
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2楼2016-02-27 08:26:22
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-02-27 08:26:22
如果载体上插入位点前有了起始密码子，就可以去掉。

我是在HA标签前插入了ATG，大概的顺序是KOZAK+ATG+HA序列+目的基因CDS（不含ATG），不知道这样可以吗？
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3楼2016-02-27 08:28:55
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 雪松下的记忆 at 2016-02-27 08:28:55
我是在HA标签前插入了ATG，大概的顺序是KOZAK+ATG+HA序列+目的基因CDS（不含ATG），不知道这样可以吗？...

可以。

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雪松下的记忆
4楼2016-02-27 09:13:25
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-02-27 09:13:25
可以。
...

非常感谢！
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5楼2016-02-27 09:44:22
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