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求。。对硝基苯酚法测磷酸酯酶酶活的方法 已有1人参与
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| 对硝基苯酚法测磷酸酯酶酶活的时候，对硝基苯酚的标准液的制备的时候，需要保持和样品液一样的PH吗，还是说，只要用水就可以了。 |
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zinfly
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【答案】应助回帖
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sytucom: 金币+1, 回帖精彩，谢谢参与 2016-03-31 23:21:05
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给你一个参考： 方法： 配制p-NPP底物溶液（0.09mg/L)和p-NP标准溶液（0.03mg/L)；将p-NP标准溶液用无水乙醇溶液稀释成适当的梯度，加入5mL0.5mol/L的三氯乙酸混合，再加入15mL0.5mol/L NaOH调pH值，直至pH值与加酸前一致，分别测定吸光度，绘制吸光度-浓度关系曲线。 取4mLp-NPP底物溶液，37℃预热5min后加入1mL酶液，反应10min后立即加入5mL0.5mol/L的三氯乙酸混合均匀，放置5min终止反应，再加入15mL0.5mol/L NaOH调pH值，直至pH值与反应前一致（将1mL去离子水替换1mL酶液，其他条件不变，即得空白），于410nm测定吸光度。对照标准曲线算出生成的对硝基苯酚浓度，进而计算出酶活力。 注释：单位mg/L可能有问题，主要是看看方法。 来源http://wenku.baidu.com/link?url= ... c4y7tVIyS4RXeCDlgBi |
2楼2016-02-27 10:40:27
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