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liutiefes

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[求助] 求教各位前辈关于Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1:1)的使用方法已有3人参与

求教，各位前辈，用凝胶Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1:1)时，一般流速开多少秒合适，每次大约接多少毫升？我们实验室的凝胶柱大概高150cm,内径1cm,每上样一次的周期大概多长时间算正常？（总是感觉，凝胶处理样品，周期太长，而且点板麻烦，获得纯品的概率又很低，不知道是不是我的方法有误？）

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Journal of Molecular Catalysis A: Chemical 投稿状态求教，投过该杂志的前辈已经有3人回复

登高必自卑，行远必自迩

1楼 2016-02-26 18:41:19

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【答案】应助回帖

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liutiefes: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-09 07:14:46

横截面积：0.78平方厘米柱体积117.75立方厘米（ml）这个柱料的最大线性流速是720cm/h，你柱子最大体积流速就是9.36ml/min.使用流速一般3分之一最大流速。

所以流速可以开到3ml/min,跑完整个柱子周期40min左右。你用的正向洗脱。若要分离效果好，要分离的物质建议先浓缩，在上样，上样体积控制在10ml以内会比较好。

每次接多少，要看你分离的啥物质，样品都含啥物质，杂志，目标的含量比例怎么，这个你要慢慢试试，建议先1ml吧。然后分开了，在检测，把同一物质集合起来。祝顺利。