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分类 共搜索到 101 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 染色质免疫沉淀（ChIP）实验
随后通过超声或酶切将染色质碎裂为小片段，再利用特异性抗体富集目标蛋白-DNA复合物，最终通过PCR、测序等...超声（如达远辰光BoFU聚焦超声）或酶切（如MNase）将染色质碎裂为200-500bp片段。...
 Longlight 2025-04-01 01:55
新药研发 干货分享|PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
模板DNA：来源比较广，用于复制的PCR模板可以是任何DNA来源，如基因组DNA（gDNA）、互补DNA（cDNA）和质粒DNA。不过，DNA的组成或复杂度会影响PCR扩增的最佳起始量。例如，在起始量为50?L...
 生物医药实验外 2024-08-29 01:41
分子生物 生信专区｜全基因组DNA甲基化测序数据工作流程分析和性能评估、...
TruSeq文库制备需要特别注意重复reads，其PCR扩增cycles数量大约是Accel的两倍（10-12cycles对比6-9cycles）。...Bismark、BWA-METH和gemBS显示出相同的比对速度（约每秒200-300reads0；...
 chance℃ 2024-08-07 06:33
分子生物 8个引物设计秘诀，让PCR实验成功率飙升
PCR引物设计的目的是确保PCR反应能够有效、特异性地扩增目标DNA序列。所以引物的好坏，直接关乎实验的成功。1、...图片4、引物扩增跨度：普通PCR以200-500bp为宜，实时荧光PCR则为70-150bp。...
 YX科研小助理 2024-05-21 07:48
医学 5分钟学会如何设计PCR引物
PCR（polymerasechainreaction），即聚合酶链反应，又称基因体外...在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；...
 科研虫子小助手 2024-05-11 05:17
生物科学 5分钟学会如何设计PCR引物
PCR（polymerasechainreaction），即聚合酶链反应，又称基因体外...在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；...
 科研战神·王 2024-04-30 02:26
医学 PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
模板DNA：来源比较广，用于复制的PCR模板可以是任何DNA来源，如基因组DNA（gDNA）、互补DNA（cDNA）和质粒DNA。不过，DNA的组成或复杂度会影响PCR扩增的最佳起始量。例如，在起始量为50?L...
 医学验证123 2024-04-19 05:31
分子生物 地高辛标记探针技术
标记前的DNA要经加热变性成为单链，标记效率较高，一般每20-25个核苷酸掺入一个Dig-11-dUTP，标记探针长度可为在200-2000bp不等...少量的基因组DNA(1ng～50ng)便可直接通过PCR进行扩增、标记。...
 长沙瀚辰生物 2024-04-01 07:30
分子生物 如何设计PCR引物
PCR（polymerasechainreaction），即聚合酶链反应，又称基因体外...在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；...
 科研战神·王 2024-02-29 01:15
生物科学 质粒提取的小技巧
将amp浓度提高到200μg/mL，下班前接种，次日一早收获菌体，...也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入...
 Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
分子生物 实验干货|分子克隆实验——无缝克隆
通过T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶，三种酶同时发挥功能，从而达到单片段或多片段与载体连接的...注2：单片段重组反应，若单个插入片段的长度小于200bp，则插入片段应使用5倍的用量；...
 李英华001 2023-07-28 01:05
医学 5分钟学会如何设计PCR引物
2、避开产物的二级结构区某些引物无效的主要原因是引物重复区DNA...在标准PCR反应体系中，用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP（四种dNTP各200μmol/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；...
 28968058wj 2023-05-09 02:53
分子生物 [分子生物学】SNP分型服务
通过进行样品基因组DNA抽提,并进行定量PCR检测,帮您轻松完成大量样品的检测与分析。TaqMan实验原理:针对染色体上...2、需要提供目的SNP位点的rs号或该位点上下游各200bp的序列以及突变的类型。...
 987293587 2022-07-11 05:23
生物科学 技术解读|ChIP-seq技术简介——深圳易基因科技分享
原理：甲醛处理细胞使目标蛋白与DNA交联，通过超声波将交联后的染色质打断成小片段，一般在200-600bp范围内。...最后，去交联并对纯化后DNA进行PCR扩增，高通量测序，最后与已有基因组序列进行...
 易基因科技 2021-08-19 06:32
分子生物 PCR文库，是否成功
DNA超声波打断成200-300bp，加接头，二次PCR后，最终产物电泳图是这样的，是否建库成功？
 南农兽医 2021-03-24 02:33
分子生物 定量PCR 引物、探针设计原则
45bp（最好是20-30bp)，以保证结合特异性检测探针的DNA折叠和二级...如果欲进行2StepRT-PCR反应的第二步PCR扩增反应，第一步的RT反应液作为DNA模板时的添加量不要超过PCR反应液总体积的10%。...
 yinuo2066 2019-07-02 07:53
分子生物 【技术资源】PCR常见问题汇总
需用重组缺陷大肠杆菌菌株，如SURE细胞PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.1～2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5...
 dandichen 2019-06-24 02:26
分子生物 关于PCR
引物大小大概是10几个bp，DNA大小为140bp，但是琼脂糖凝胶电泳之后的结果是有两条带，其中一条在100多，另一条在200多，求助各位大神，出现这样的结果的原因是什么?biostar2009wizardfan
 biu_keke 2019-03-14 04:53
微生物 【分享】第九届中国分子诊断技术大会亮点报告
ＰＣＲ扩增参数：预变性９４°Ｃ，５ｍｉｎ；２５个循环：变性９４°Ｃ３０ｓ，退火５２°...保留含有上下游引物的序列，然后去除引物和接头序列，去除序，２００ｂｐ或者＞１６００ｂｐ序列；...
 生物小虫007 2018-11-16 07:39
分子生物 纯干货丨大神解答关于无缝克隆技术的常见问题
（2）只需简单的PCR扩增就可以制备目的片段，不需要内切酶、连接酶和磷酸化酶；（3）可以用于单一或多片段DNA的克隆，而不用考虑片段长度和...07小于200bp的双链DNA片段可以使用无缝克隆吗？...
 华联科生物 2018-10-30 08:58
分子生物 【涨知识】凝胶迁移实验（EMSA）
对于100微升标记好的探针，加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵，再加入2体积即200微升的无水乙醇，混匀。2.在-70℃至...目的DNA的长度应小于300bp，以有利于非结合探针和蛋白DNA复合物的电泳分离。...
 华联科生物 2018-09-03 07:33
分子生物 PCR反应中基本成分的作用
PCR(聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤，即：模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分，依次为：引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。1、...
 华联科生物 2018-07-25 10:34
分子生物 ChIP实验讲堂精彩内容分享！
所谓凝胶阻滞迁徙实验，就是在凝胶电泳中，由于电场作用，小分子DNA片段，比如50~200bp左右这样的DNA片段，与其结合的蛋白质，在相互...检测方法有PCR和QPCR，QPCR可以检测到与蛋白结合的DNA的...
 华联科生物 2018-07-16 09:27
分子生物 【涨知识】凝胶迁移实验（EMSA）
对于100微升标记好的探针，加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵，再加入2体积即200微升的无水乙醇，混匀。2.在-70℃至...目的DNA的长度应小于300bp，以有利于非结合探针和蛋白DNA复合物的电泳分离。...
 华联科生物 2018-05-22 09:50
分子生物 PCR陷阱:细节决定成败
陷阱1起始模板不合格良好的开端往往带来成功的结局，使用高质量的DNA模板对于最终得到的PCR产物是至关重要的。理想情况下,最好的DNA样本...对于富含AT的区域，使用比标准的18-22bp更长的引物。...
 myhalic 2018-04-08 08:33
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