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分子生物 实验干货|分子克隆实验——无缝克隆
②反向PCR扩增制备载体末端引物设计：反向PCR扩增制备线性化载体需要使用的引物；...推荐使用高保真PCRMix进行扩增，推荐使用预线性化的质粒作为模板，以减少环状质粒模板残留对克隆阳性率的...
 李英华001 2023-07-28 01:05
转基因 等温扩增技术的原理及应用
在反向引物与AMV酶的作用下形成含有T7启动子序列的DNA双链；在T7RNA聚合酶的作用下完成转录过程，产生大量...普通RCA的过程为：引物与环状DNA模板结合后延伸，生成含有大量目的基因的DNA单链。...
 小小书虫飞 2020-11-27 08:32
分子生物 反向pcr模板是环状
模板为环状DNA，在做反向pcr过程中还需要环化吗？个人认为貌似不需要了，但是没有查到相关文献，有知道朋友可以解答一下吗？biostar2009飞约疯人院wizardfan
 覃尼美 2020-11-22 02:54
硕博家园 错过后悔！常用的PCR方法分享
反向PCRInversePCR反向PCR是反向互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段。...在DNA连接酶作用下自连形成环状DNA分子，然后利用方向合适并与已知序列两端互补的引物，以连接成环的DNA为模板...
 shu24215 2019-10-22 07:34
硕博家园 错过后悔！常用的PCR方法分享
反向PCRInversePCR反向PCR是反向互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段。...在DNA连接酶作用下自连形成环状DNA分子，然后利用方向合适并与已知序列两端互补的引物，以连接成环的DNA为模板...
 rong5320 2019-10-21 03:21
硕博家园 错过后悔！常用的PCR方法分享
反向PCRInversePCR反向PCR是反向互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段。...在DNA连接酶作用下自连形成环状DNA分子，然后利用方向合适并与已知序列两端互补的引物，以连接成环的DNA为模板...
 zhongren12 2019-10-17 09:49
分子生物 纯干货丨大神解答关于无缝克隆技术的常见问题
反向PCR可扩增一段已知序列的两端未知序列。反向PCR扩增载体，即利用载体上的一段已知序列设计引物，利用高...（2）要求被扩增载体是环状载体，因此如果载体是线性的，需要先将载体连接环化；...
 华联科生物 2018-10-30 08:58
硕博家园 菌液测序常见的问题
（1)PCR产物直接测序可以反映模板的真实情况；（2)省去克隆的实验费用和时间；（3)PCR产物测序正确的片段进行下一步克隆实验使结果更有保障；（4)混合模板进行...这样的情况，建议反向测序。...
 晋鹏 2016-01-24 10:45
分子生物 基因工程课程小结
（4）如果已知了侧翼序列，可用反向PCR和锅鈵PCR进行扩增。此外，对于未知序列的基因，我们同样可用PCR扩增。有时候...粒是存在宿主细胞内，独立于染色体外的可自主复制闭合环状的DNA分子。...
 姑娘 2012-04-07 03:23
生物科学 【转帖】中国《慢性乙型肝炎防治指南》
HBV侵入肝细胞后，部分双链环状HBVDNA在细胞核内以负链DNA为模板延长正链以修补正链中的裂隙区，形成共价闭合环状DNA(cccDNA)；...(PCR法)、ALT水平正常，肝组织学无炎症或仅有轻度炎症；...
 wending7000 2010-12-13 03:38