24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 50  |  回复: 1
【悬赏金币】回答本帖问题,作者天使的茶将赠送您 10 个金币

天使的茶

铁虫 (小有名气)

现在遇到了一个问题,就是通过提取总蛋白检测转基因种子GFP含量,结果发现非转基因种子与转基因种子的GFP含量几乎一样多。

通过紫外照射已经确定非转基因种子不含GFP,而转基因种子含有GFP。并且差异明显。

是不是蛋白提取过程中有问题?

我的方法是
Protein extraction buffer = 1M Tris, 5mM EDTA, 0.1% SDS + Proteinase inhibitors
1,把种子(大豆种子)放到离心管里,然后加入蛋白提取液,冰箱4度过夜。
2,第二天用研磨杵充分研磨,同时再加入等量蛋白提取液。
3,然后95度水浴20分钟。
4,之后离心15分钟,取上清,再离心15分钟。
5,最后取上清,得到蛋白液。

然后分别测总蛋白和GFP含量。最后得到GFP和总蛋白的比。

GFP测量用光谱仪,总蛋白测量用bradford。。

但是不仅仅是比很接近,连测出来的总蛋白和GFP的数值也很接近。

重复了好多次都是这个问题,和老板说过几次,但是老板不认为这个方法有问题。

请问具体问题在哪里???
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天使的茶 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 真的好想读博! +15 wangzhe_bs 2024-04-22 20/1000 2024-04-26 21:26 by 小木雄子
[论文投稿] 研二光催化6月底四篇二区什么水平 5+5 wjtab 2024-04-22 15/750 2024-04-26 19:25 by wjtab
[考研] 学硕专硕 +5 小蜗牛* 2024-04-26 5/250 2024-04-26 16:43 by 鱼翔浅底1
[考博] 申博求助 +4 dskabdh 2024-04-24 11/550 2024-04-26 15:54 by dskabdh
[教师之家] 博士论文被抄袭 +25 和尚敲小木鱼 2024-04-22 42/2100 2024-04-26 13:55 by ZHONGWU_U
[考博] 取博导收留 5+4 zzb777888 2024-04-20 10/500 2024-04-26 08:52 by polymerfriend
[教师之家] 某种做法不行。说过几遍了。同学还那样做。再那样做就给低分 +4 河西夜郎 2024-04-24 4/200 2024-04-26 08:51 by Quakerbird
[找工作] 普通院校药学硕士,做合成的,感觉找不到工作 +9 pom戴墨镜 2024-04-24 16/800 2024-04-26 08:37 by lfq_198989
[论文投稿] Nature一直在编辑手里,考虑好几天了,是悬了吗 +12 彩虹初见 2024-04-24 12/600 2024-04-25 19:21 by 雪径踏青
[教师之家] 期末给学生划重点都是什么话术啊 +16 luokereng 2024-04-20 18/900 2024-04-25 15:46 by BusyGer
[考博] 求博导 +6 好okjh 2024-04-21 10/500 2024-04-25 14:04 by 好okjh
[论文投稿] 一直找不到审稿人 +5 lizhengke06 2024-04-21 6/300 2024-04-25 14:01 by chongdong
[基金申请] 国社科项目,你们学校都限额申报吗? +7 屡战屡败 2024-04-21 10/500 2024-04-25 12:10 by 屡战屡败
[电化学] 耗材发问 +4 Happy C 2024-04-22 4/200 2024-04-25 11:03 by 普通小虫
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
[基金申请] 化学结清有情发出来了 +3 starboy7286 2024-04-20 3/150 2024-04-24 15:52 by 嘿,黑贝
[论文投稿] 期刊推荐 20+4 木颜尘ip 2024-04-22 7/350 2024-04-24 10:06 by bobvan
[考博] 申博成果界定是根据Jcr分区还是中科院分区 +4 我属驴核动力驴 2024-04-22 5/250 2024-04-24 08:47 by 晓目崇
[论文投稿] 编辑是选国外的好还是国内的好。 +8 lizhengke06 2024-04-20 8/400 2024-04-22 08:58 by cuiyunjian
[硕博家园] 材料工程,二本硕士,值得读吗 +3 简风23 2024-04-20 6/300 2024-04-21 12:19 by 简风23
信息提示
请填处理意见