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hengdipu

金虫 (初入文坛)

[交流] RNA琼脂糖凝胶电泳已有3人参与

想问一下大家,跑RNA凝胶电泳可不可以就用DNA电泳的那一套,跑琼脂糖凝胶电泳,TAE缓冲液是新鲜配制的,只是没有用DEPC水配制,跑胶之前电泳器具用DEPC水处理了一下,上样体系用DEPC水补齐,还有需要注意的吗,或者这几步有漏洞吗
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simao1919

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-20 20:28:18
看你后期需不需要用这个胶图,如果要用,最好还是TBE,只看下完整性,TAE和TBE都可以,上样的枪头无酶就好,保证留下的免于污染

发自小木虫IOS客户端
2楼2019-07-20 08:59:16
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123456zmj

银虫 (正式写手)

3楼2019-07-20 09:36:15
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hengdipu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by simao1919 at 2019-07-20 08:59:16
看你后期需不需要用这个胶图,如果要用,最好还是TBE,只看下完整性,TAE和TBE都可以,上样的枪头无酶就好,保证留下的免于污染

请问你们平时RNA跑电泳的时候缓冲液是用DEPC水配制的吗,我就直接用原来跑DNA的缓冲液跑的,还有TBE为什么比TAE更好呢
4楼2019-07-20 09:55:20
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雪色残洋

铜虫 (初入文坛)

5楼2019-07-20 14:46:55
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hengdipu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 雪色残洋 at 2019-07-20 14:46:55
DEPC水配制

如果缓冲液不用DEPC水配制,影响大吗,感觉用量好大啊
6楼2019-07-20 15:05:38
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simao1919

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: originally posted by hengdipu at 2019-07-20 09:55:20
请问你们平时rna跑电泳的时候缓冲液是用depc水配制的吗,我就直接用原来跑dna的缓冲液跑的,还有tbe为什么比tae更好呢...

严格来说tbe是要depc水配置的,但我是纯水仪的水直接配的,应该是rna free water,仪器好像是得18 Ω(具体单位忘记了)出的水才达标,rna用tae和tbe跑出来的清晰度和背景不大一样,tae的像素差点。不要在基础实验方法上寻求创新,浪费时间,搞清楚目的再选择方法:如果只看有没降解,tae也行;如果看28,18的比例,还是tbe清晰。这边实验室rna实验是一个单独区域,只有tbe,没有tae。

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7楼2019-07-20 22:53:42
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hengdipu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by simao1919 at 2019-07-20 22:53:42
严格来说tbe是要depc水配置的,但我是纯水仪的水直接配的,应该是rna free water,仪器好像是得18 Ω(具体单位忘记了)出的水才达标,rna用tae和tbe跑出来的清晰度和背景不大一样,tae的像素差点。不要在基础 ...

好的,方便加一下QQ以后交流吗,2702687467
8楼2019-07-22 08:34:35
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