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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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hengdipu

金虫 (初入文坛)

[交流] RNA琼脂糖凝胶电泳已有3人参与

想问一下大家，跑RNA凝胶电泳可不可以就用DNA电泳的那一套，跑琼脂糖凝胶电泳，TAE缓冲液是新鲜配制的，只是没有用DEPC水配制，跑胶之前电泳器具用DEPC水处理了一下，上样体系用DEPC水补齐，还有需要注意的吗，或者这几步有漏洞吗
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1楼2019-07-20 08:52:03
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simao1919

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-20 20:28:18
看你后期需不需要用这个胶图，如果要用，最好还是TBE，只看下完整性，TAE和TBE都可以，上样的枪头无酶就好，保证留下的免于污染

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2楼2019-07-20 08:59:16
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123456zmj

木虫 (著名写手)
处理好就行

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3楼2019-07-20 09:36:15
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hengdipu

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by simao1919 at 2019-07-20 08:59:16
看你后期需不需要用这个胶图，如果要用，最好还是TBE，只看下完整性，TAE和TBE都可以，上样的枪头无酶就好，保证留下的免于污染

请问你们平时RNA跑电泳的时候缓冲液是用DEPC水配制的吗，我就直接用原来跑DNA的缓冲液跑的，还有TBE为什么比TAE更好呢
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4楼2019-07-20 09:55:20
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雪色残洋

铜虫 (小有名气)
DEPC水配制

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5楼2019-07-20 14:46:55
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hengdipu

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 雪色残洋 at 2019-07-20 14:46:55
DEPC水配制

如果缓冲液不用DEPC水配制，影响大吗，感觉用量好大啊
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6楼2019-07-20 15:05:38
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simao1919

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼: originally posted by hengdipu at 2019-07-20 09:55:20
请问你们平时rna跑电泳的时候缓冲液是用depc水配制的吗，我就直接用原来跑dna的缓冲液跑的，还有tbe为什么比tae更好呢...

严格来说tbe是要depc水配置的，但我是纯水仪的水直接配的，应该是rna free water，仪器好像是得18 Ω（具体单位忘记了）出的水才达标，rna用tae和tbe跑出来的清晰度和背景不大一样，tae的像素差点。不要在基础实验方法上寻求创新，浪费时间，搞清楚目的再选择方法：如果只看有没降解，tae也行；如果看28，18的比例，还是tbe清晰。这边实验室rna实验是一个单独区域，只有tbe，没有tae。

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7楼2019-07-20 22:53:42
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hengdipu

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by simao1919 at 2019-07-20 22:53:42
严格来说tbe是要depc水配置的，但我是纯水仪的水直接配的，应该是rna free water，仪器好像是得18 Ω（具体单位忘记了）出的水才达标，rna用tae和tbe跑出来的清晰度和背景不大一样，tae的像素差点。不要在基础 ...

好的，方便加一下QQ以后交流吗，2702687467
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8楼2019-07-22 08:34:35
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