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你是路人甲

铜虫 (小有名气)


[交流] A549慢病毒转染后对照细胞出现异常

最近用慢病毒携带目的基因转染肺腺癌A549细胞,慢病毒转染GFP空白质粒组作为阴性对照,但克隆形成、划痕及transwell都显示慢病毒转染GFP空白质粒组(对照组)较未转染病毒组细胞(A549组)侵袭、增殖的快,请问这是什么原因?
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


慢病毒是携带外源基因进入细胞了,难免对细胞本身产生影响。另一方面,不知道慢病毒整合到细胞基因组的哪里,可能就恰好整合到促进生长的那一段基因前面了。建议降低感染细胞使用的病毒数,选择合适的MOI,最好能做个梯度试试。用病毒的话也有些缺点,最明显的就是价格比较贵,10*8级滴度的病毒,找公司包装的话,一般要10000元以上,我们实验室经费有限,虽然做过A549的转染,是用RFect siRNA转染方法做的,对细胞的伤害相对小好多
3楼2019-03-15 16:51:43
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diaoqinzho

银虫 (正式写手)



你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
外源性基因本身对细胞就有影响,实验前要先摸下慢病毒的浓度,寻找一个对细胞生长影响不大,感染效率又符合实验要求的浓度

发自小木虫IOS客户端
6楼2019-06-24 13:52:47
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简单回复
2019-03-15 12:29   回复  
你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
youngen4楼
2019-03-16 07:57   回复  
你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
youngen5楼
2019-03-16 07:58   回复  
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