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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 敲除EGFP基因，为啥有20%的细胞绿色荧光变弱，而不是完全消除呢？
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 敲除EGFP基因，为啥有20%的细胞绿色荧光变弱，而不是完全消除呢？已有1人参与

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1楼2019-01-14 15:19:01
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redking2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2019-01-21 06:48:31
因为你的细胞里边应该不止一个EGFP拷贝, 有可能之前在构建EGFP细胞系的时候由于random integration导致细胞不仅仅在target的位置插入EGFP的表达序列, 在基因组的其它位置也可能存在.
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6楼2019-01-20 21:45:36
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redking2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rainontime: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2019-03-20 09:30:15
引用回帖:
6楼: Originally posted by redking2012 at 2019-01-20 21:45:36
因为你的细胞里边应该不止一个EGFP拷贝, 有可能之前在构建EGFP细胞系的时候由于random integration导致细胞不仅仅在target的位置插入EGFP的表达序列, 在基因组的其它位置也可能存在.

所以你敲除的时候,很可能只敲除了一部分, 剩下来的部分即使表达EGFP,跟敲之前的多拷贝相比也会表达变弱.  

楼上的很多回复都是缺乏认真思考.
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7楼2019-01-20 21:49:27
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