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\\\'Artemis

新虫 (小有名气)


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求大神解决肿瘤细胞培养问题
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我们实验室是刚开始建立细胞间,培养hela细胞,从17年底断断续续到现在已经培养六个月左右了,但是一直出问题,刚开始不太懂,死了有很多原因,但是已经不记得了。最近在培养细胞的时候,从别的实验室拿来的细胞传完一代之后状态一直不好,培养基中悬浮一些像沙子一样的东西,还有漂浮的细胞,导致在没有更换培养基的情况下都看不清培养瓶下贴壁的细胞,而且培养基很快就变黄(1640的培养基12小时就变为橙色了),细胞也基本不繁殖,还会死去,每天换液只会维持细胞数量降低的速度减慢,附上几张图,都是遇到的各种问题,求大神指导。

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\\\'Artemis

新虫 (小有名气)


这几张图都是一盒快要凋亡没了的培养基里的细胞,请问图一图二中的是凋亡的细胞聚在一起了还是某种菌的菌落?后面的图是想问下两个细胞间连起来的东西是什么,是破碎的肿瘤细胞的细胞质还是也是细菌之类的物质呀?

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7楼2018-05-08 21:15:50
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\\\'Artemis

新虫 (小有名气)


引用回帖:
24楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-05-09 07:43:04
不太像污染,培养液混浊么?我觉得是培养基出了问题,是不是冰箱放置超过一个月了,或者过期。补充一些谷氨酰胺试试,蛋白合成被抑制了

这是换完液后拍下的照片。
更换培养基(1640)后12小时就浑浊发黄,把培养瓶倾斜,可以看到白色的物质,从显微镜下可以看到细胞的上面漂浮了一层像沙子一样的物质,导致看不清楚下面的细胞

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25楼2018-05-09 10:19:01
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\\\'Artemis

新虫 (小有名气)


送红花一朵
引用回帖:
26楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-05-09 14:36:18
那就是污染了,确定无疑,我以为培养基没浑浊呢...

这样情况还可以补救吗?还有您知道这具体是什么污染吗?真菌细菌还是支原体之类的呀?

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27楼2018-05-09 14:48:04
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