应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 怎么测反转出来的cDNA全长
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
31/1返回列表
查看: 367  |  回复: 2
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 怎么测反转出来的cDNA全长已有1人参与

我用rna反转出来了cDNA，能不能把cdna跑一下胶看看有多长。然后连到T载体上去测序呀。。
。或者其他简单办法可以知道cdna全序列吗?

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2018-04-26 12:20:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wareer

铜虫 (小有名气)
RNA本来就是混合物，反转合成的cDNA也是混合物啊，你做的不对。除非用引物从cDNA中扩增某个基因，才可行。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2018-04-26 15:07:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
草哥cium: 金币+5, ★★★很有帮助 2018-04-27 00:27:23
反转的cDNA可以跑胶看，最好能跑安捷伦2100 HS芯片检测，比较直观，克隆到t载体送sanger肯定没法测。如果想测全长cDNA，pacbio三代测序iso-seq，了解一下。
流程大概race方法反转mRNA,用通用引物扩全长cDNA,三代加接头建库，在sequel或RSII平台上机测序。跟二代RNAseq比，三代可以直接测出全长转录本，不用预测和拼接，一般用在转录本注释上。
赞一下 回复此楼
2019更好更棒!
3楼2018-04-26 17:21:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 草哥cium 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 材料方向24博士申请/一作SCI三篇 +3 白天不碰 2024-04-24 5/250 2024-04-27 17:41 by 安塔瓦拉多
[硕博家园] 失之东隅 收之桑榆 +3 半世迷离 2024-04-27 6/300 2024-04-27 17:25 by yz仔
[考博] 真的好想读博！ +16 wangzhe_bs 2024-04-22 23/1150 2024-04-27 17:10 by @tanzelin
[基金申请] 基金开始函评了吗？ +17 wych1103 2024-04-25 17/850 2024-04-27 16:49 by arthas_007
[论文投稿] 研二光催化6月底四篇二区什么水平 5+5 wjtab 2024-04-22 16/800 2024-04-27 15:47 by cuan118
[论文投稿] Nature一直在编辑手里，考虑好几天了，是悬了吗 +13 彩虹初见 2024-04-24 13/650 2024-04-27 15:24 by cuan118
[找工作] 普通院校药学硕士，做合成的，感觉找不到工作 +11 pom戴墨镜 2024-04-24 19/950 2024-04-27 15:15 by 奔赴远方
[有机交流] 环肽的合成 +3 徐来不惊 2024-04-25 6/300 2024-04-27 13:54 by xxzhangci
[基金申请] "颜宁:基础研究应顶天立地"能做到基础研究同时顶天立地的才是牛人 +6 zju2000 2024-04-24 6/300 2024-04-27 10:17 by kcmn1000
[论文投稿] 投稿RSC旗下杂志突然间看不到投稿状态，里面投稿的文章信息不见了，有遇到过的吗？ 50+3 dlying 2024-04-26 3/150 2024-04-27 09:58 by bobvan
[论文投稿] AC审稿 +3 马winner 2024-04-26 6/300 2024-04-27 09:08 by 马winner
[硕博家园] 聊天 +12 暮色恋伊人 2024-04-22 13/650 2024-04-27 08:40 by WASM
[有机交流] 如何分离原料与产品 5+4 qwerasdf587 2024-04-24 13/650 2024-04-26 23:18 by 119966984
[考研] 0854－0855调剂 +8 shangannum1 2024-04-21 12/600 2024-04-26 16:42 by yz仔
[教师之家] 某种做法不行。说过几遍了。同学还那样做。再那样做就给低分 +4 河西夜郎 2024-04-24 4/200 2024-04-26 08:51 by Quakerbird
[论文投稿] 一直找不到审稿人 +5 lizhengke06 2024-04-21 6/300 2024-04-25 14:01 by chongdong
[基金申请] 国社科项目，你们学校都限额申报吗？ +7 屡战屡败 2024-04-21 10/500 2024-04-25 12:10 by 屡战屡败
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
[论文投稿] 期刊推荐 20+4 木颜尘ip 2024-04-22 7/350 2024-04-24 10:06 by bobvan
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭