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丝状真菌基因敲除，转化子假阳性过多
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大家好。本人最近在做一种丝状真菌基因敲除实验。用的是PEG介导转化的方法，实验过程与步骤没有什么大的问题，也可以拿到转化子，但是在后期验证的过程中发现转化子都是假阳性。目的基因未能被敲掉，但是潮霉素基因已被整和到真菌的基因组上。在后期的实验中，调整了原生质体的浓度，转化片段的浓度，均未获得正确的转化子。 请各位大神提供一下指导意见或者改进措施能够减少假阳性的概率，提高基因敲除效率。（原生质体的制备与转化没问题，可以获得转化子，但是转化子均是假阳性，目的基因和潮霉素基因都存在） |
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8楼2018-03-27 17:14:29
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