应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 找不到合适的内参怎么办
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
61/1返回列表
查看: 1869  |  回复: 5
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者18288973959将赠送您 5 个金币

18288973959

新虫 (初入文坛)

[求助] 找不到合适的内参怎么办已有1人参与

最近用trizol提总RNA，提完后，用仪器检测RNA浓度与纯度（纯度A260/A280大约在1.9~2.1），然后将全部RNA配成相同浓度，接着进行逆转，做qPCR。很奇怪，在这种情况下各组内参基因跑出了差距很大的CT值，跨度7-13不等，理论上来说，不应该啊。正常对照组与实验组内参CT总是有比较大的差距，怎么办？前前后后，我已经提了两次RNA，用了不同的逆转录试剂盒，最终跑出来的趋势基本一致：CT内参＜CT实验组。这么多内参基因都不稳定……都不想再摸索了。请问可以用总RNA量作为对照吗？（就是把个样品RNA配成相同浓度后逆转）@biostar2009
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼2018-01-22 12:23:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anona

铜虫 (初入文坛)
楼主找到解决办法了么，遇到同样问题，actin 和GADPH 都一样
赞一下 回复此楼
2楼2018-01-28 20:32:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyyz365

铜虫 (小有名气)
我也想知道

发自小木虫Android客户端
回复此楼
3楼2018-01-28 23:47:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

问一下，你确定搞明白qPCR原理了吗？
比如为什么要∆∆ct？具体指什么

我觉得你搞明白这个，可能你的问题就自解了
赞一下 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-29 11:45:19
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大文盲

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 18288973959 at 2018-01-22 12:23:48
最近用trizol提总RNA，提完后，用仪器检测RNA浓度与纯度（纯度A260/A280大约在1.9~2.1），然后将全部RNA配成相同浓度，接着进行逆转，做qPCR。很奇怪，在这种情况下各组内参基因跑出了差距很大的CT值，跨度7-13不等 ...

楼主解决了吗，我遇到同样问题很苦恼，QQ469024841，想向您有偿咨询，跪谢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-09-12 12:09:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Muggle1004

新虫 (初入文坛)
楼主问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2022-04-26 21:27:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18288973959 的主题更新
61/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 论文翻译-EnPapers美助理教授团队-SCI英文润色
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 真的好想读博！ +15 wangzhe_bs 2024-04-22 18/900 2024-04-26 17:20 by 小木雄子
[基金申请] 基金开始函评了吗？ +15 wych1103 2024-04-25 15/750 2024-04-26 17:10 by xuechenli
[有机交流] 环肽的合成 +3 徐来不惊 2024-04-25 5/250 2024-04-26 16:56 by 徐来不惊
[论文投稿] with editor 两个月了，什么原因？ +7 yiersan9 2024-04-24 15/750 2024-04-26 16:13 by jonewore
[论文投稿] 研二光催化6月底四篇二区什么水平 5+5 wjtab 2024-04-22 14/700 2024-04-26 15:02 by 莱茵润色
[考博] 25年博士申请 +6 Changzixuan 2024-04-25 11/550 2024-04-26 13:48 by 我属驴核动力驴
[考研] 381求调剂 +4 小刺猬987654321 2024-04-25 6/300 2024-04-26 10:57 by czl12138
[论文投稿] Chemical Engineering Journal投稿3周了，一直显示With editor状态。这是送审了吗？ 10+4 yifeng11 2024-04-20 13/650 2024-04-26 09:48 by yifeng11
[基金申请] "颜宁:基础研究应顶天立地"能做到基础研究同时顶天立地的才是牛人 +5 zju2000 2024-04-24 5/250 2024-04-26 09:36 by LittleBush
[教师之家] 刚博士毕业，入职普通一本高校 +19 保持肌肤 2024-04-20 20/1000 2024-04-26 09:16 by zhaojp918
[考研] 没学上 +4 季向阳 2024-04-26 8/400 2024-04-26 08:52 by 18975788067
[考博] 取博导收留 5+4 zzb777888 2024-04-20 10/500 2024-04-26 08:52 by polymerfriend
[找工作] 普通院校药学硕士，做合成的，感觉找不到工作 +9 pom戴墨镜 2024-04-24 16/800 2024-04-26 08:37 by lfq_198989
[教师之家] 期末给学生划重点都是什么话术啊 +16 luokereng 2024-04-20 18/900 2024-04-25 15:46 by BusyGer
[考博] 求博导 +6 好okjh 2024-04-21 10/500 2024-04-25 14:04 by 好okjh
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
[考博] 博士招生 +4 zx179 2024-04-24 7/350 2024-04-24 15:01 by H考研成功
[教师之家] 找工作过程中碰到好多人问南京某新换校长211的政策，规定如下 +15 ZHONGWU_U 2024-04-21 17/850 2024-04-24 05:12 by juta256
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
[论文投稿] 研究光催化的，好中的三四区 20+3 sl.0117 2024-04-20 3/150 2024-04-22 09:53 by bobvan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭