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unciawang

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2018-01-20 15:57:25
测的是反转录后的cDNA浓度还是反转录前RNA浓度? 如果是前者,反转录后的cDNA浓度是不能测量的,里面有dNTP,测出来的浓度实际上是dNTP浓度,你需要在反转录前把RNA浓度调成一致再进行反转录。

我测的是逆转录后的浓度,昨天我又重新做了一次,相同样本稀释不同倍数最后发现cq值是相同的,波动范围不超过1,但是听说不同浓度的样本起跳值不一样,这又是怎么回事呢?

发自小木虫Android客户端
11楼2018-01-21 18:47:28
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by unciawang at 2018-01-21 18:47:28
我测的是逆转录后的浓度,昨天我又重新做了一次,相同样本稀释不同倍数最后发现cq值是相同的,波动范围不超过1,但是听说不同浓度的样本起跳值不一样,这又是怎么回事呢?
...

体系一般都是20ul体系的,越做小的体系误差越大。倍数一般都是10倍逐级稀释,你用一个样本做20ul体系,10倍逐级稀释cq值不可能会一样。
12楼2018-01-21 22:40:33
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大文盲

新虫 (初入文坛)

楼主解决了吗,我遇到同样问题很苦恼,QQ469024841,想向您有偿咨询,跪谢

发自小木虫Android客户端
13楼2018-09-12 12:11:52
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