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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR一直扩增不出目的条带怎么办？
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Dreamt小龟z

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR一直扩增不出目的条带怎么办？已有6人参与

PCR一直扩增不出目的条带，全是引物二聚体，做了梯度PCR也还都是引物二聚体，还有可能是哪方面的原因啊，求大神指导。嘤嘤嘤
师兄说目的条带不大，大概300bp左右，但是我出来的条带明显不是。
下图是梯度的结果，引物是从文献里找的。新手求指导啊，嘤嘤嘤

PCR一直扩增不出目的条带怎么办？@biostar2009
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1楼2017-03-20 19:23:26
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可爱范儿二

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-24 07:49:58
首先确定两条引物的Tm值相差几度（超过5度PCR较困难），如果Tm值相差超过10度，使用高保真酶就不行了，一般用Kod。
赞一下(1人) 回复此楼
25楼2017-03-23 11:28:05
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