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生物科学 干货分享|RNA反转录
进行RT-(q)PCR之前,必须完全去除DNaseI,因为任何残留的酶都会使单链DNA(如引物和cDNA)降解。...第一链cDNA可以直接用于RT-PCR等实验应用中,热稳定DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)将复制...
李英华001 2023-10-19 01:34
分子生物 关于PCR产物直接进行的平末端连接问题
PCR扩增产物5'端有3个P,这样能不能和载体上的3'-OH连接上...2.我看了一些资料上平末端连接需要载体去磷酸化,并且插入片段要进行磷酸化,请问插入片段的磷酸化是不是必要的,因为磷酸化的...
洛洛洛洛洛果 2019-09-25 10:28
分子生物 纯干货丨大神解答关于无缝克隆技术的常见问题
不一定,如果PCR产物的纯度大于90%,可以不用切胶纯化,直接使用PCR产物进行重组连接。...核酸外切酶切割5’末端,进而产生3’突出端,促进了DNA之间的互补*DNA聚合酶填充缺口*DNA连接连接...
华联科生物 2018-10-30 08:58
分子生物 如何快速高效地建立基因敲除细胞系?
关于基因编辑构建大小鼠模型,往期我们已经详细介绍过(文末...进而诱导细胞内产生内源性DNA双链断裂修复机制,即高概率的非同源末端连接修复机制(NHEJ)和低概率的同源重组修复机制(HDR)。...
华联科生物 2018-09-17 07:35
分子生物 PCR知识知多少
最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大校菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为...但PCR产物为平端,不能进行Ta克隆!...
华联科生物 2018-07-10 10:52
分子生物 PCR知识知多少
最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大校菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为...但PCR产物为平端,不能进行Ta克隆!...
华联科生物 2018-05-30 08:42
分子生物 高通量测序领域常用名词解释(转)
mRNA测序不对引物或探针进行设计,可自由提供关于转录的客观...RNA从总RNA中分离出来,两端分别加上特定接头后体外反转录做成cDNA再做进一步处理后,利用测序仪对DNA片段进行单向末端直接测序...
woody196 2013-12-23 06:14