应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用基因组DNA当模版为何扩增出CDS
51/1返回列表
查看: 3266  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

weiweitt

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用基因组DNA当模版为何扩增出CDS 已有3人参与

1.目的条带包含2个外显子加1个内含子，全长约700bp.内含子稍大于100bp。
2.用CTAB法提取植物叶片的基因组DNA做模版
3.扩增出两条带一条700bp左右正是目的条带。另一条大小500bp多，切胶回收连载体测序后发现正好是两个外显子相加没用内含子的部分，
也就是说，我用基因组DNA扩增出了CDS，请问会有什么样的可能来解释这一现象？
PS：怀疑我的DNA可能有RNA的污染，我于是将DNA用RNA酶消化了一个小时，结果仍是上述结果。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-02-19 00:08:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiweitt

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by weiweitt at 2016-02-23 15:28:31
我的引物就是跨着内含子，扩出来的东西就应该是外+内+外 这样一段东西，结果我扩增出了两条带，把这两条带都回收测序了，一条就是预期的外+内+外，另一条是外+外，中间100多bp的内含子没有了。所以我不明白多出来的 ...

哦不好意思，没太看懂您的建议，能说的仔细些吗
赞一下 回复此楼
10楼2016-02-23 15:31:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

weiweitt

铁虫 (初入文坛)
这个帖子会有人看见么？第一次发
赞一下 回复此楼
2楼2016-02-19 11:17:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by weiweitt at 2016-02-19 11:17:04
这个帖子会有人看见么？第一次发

已经被看了20次……
但是真的不知道什么原因，按理来讲，就算有RNA污染也不会出现不含内含子的CDS片段，因为PCR酶是要以DNA为模板才能进行扩增的，RNA是不行的，难道是样品里面的RNA已经被逆转录了……好神奇~
赞一下 回复此楼
3楼2016-02-19 12:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adamhe

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
搞笑，只有DNA酶没用
赞一下 回复此楼
4楼2016-02-19 16:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 接受任何调剂 +4 也就是栗子 2026-04-17 4/200 2026-04-17 17:57 by Equinoxhua
[考研] 295分求调剂 +5 ?要上岸? 2026-04-17 5/250 2026-04-17 16:51 by fenglj492
[考研] 0854求调剂 +21 门路摸摸 2026-04-15 25/1250 2026-04-17 15:45 by qzxyhcsy
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +11 刘墨墨 2026-04-13 11/550 2026-04-17 15:35 by wanganpin
[考研] 335求调剂 +20 想上岸呀！！ 2026-04-12 23/1150 2026-04-17 10:50 by cuisz
[考研] 300求调剂 +11 橙a777 2026-04-15 11/550 2026-04-16 22:43 by cfdbai
[考研] 22专硕求调剂 +10 haoyun上岸 2026-04-11 12/600 2026-04-16 22:21 by 猪会飞
[考研] 22408 312求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-14 25/1250 2026-04-16 21:21 by Art1977
[考研] 297，工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 7/350 2026-04-16 14:31 by zhouxiaoyu
[考研] 290调剂生物0860 +38 哇哈哈，。 2026-04-11 44/2200 2026-04-16 09:52 by cuisz
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 一志愿A区211，22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:37 by zs92450
[考研] B区0809 ，数一英一，290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 297工科，求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 346分，工科0854求调剂，专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭